[发明专利]一种高效液相色谱法快速检测茶叶中掺杂蔗糖

摘要

本发明公开了一种高效液相色谱法快速检测茶叶中掺杂蔗糖，采用高效液相色谱仪对茶叶中掺杂的蔗糖进行准确定量测定，主要步骤包括：检测样的预处理、测定等步骤。高效液相色谱具有分离效率高、分析速度快、检测灵敏度高和应用范围广泛的特点，特别适合于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物的分离分析。根据现有实验室条件，考虑到操作方便，稳定可靠，故障率低。再根据蔗糖的性质，在紫外区无吸收，而是具有一定的折光率，故选择了配有示差折光检测器的高效液相色谱仪。本发明实现了对茶叶加工过程外加蔗糖的定性及定量快速测定，具有仪器简单、检测成本低、灵敏度高等特点，对操作者的专业化水平要求低，适用于我国茶叶生产和流通相对分散的特点，在茶叶生产、流通及监督过程具有推广应用价值。

主权项

1.一种高效液相色谱法快速检测茶叶中掺杂蔗糖的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：(1)样品预处理：将茶叶样品置于65℃烘箱中烘24h至恒重，防潮处理，碾碎成粉末，至可以过60目筛子；（2）样品预处理：准确称取5g（精确到 0.01 g）试样至50 mL 具塞塑料刻度离心管中，用水定容至刻度，混匀，经超声浸提10 min 后，以不低于3000 r/min离心10min，准确吸取上清液5.00 m L于另一个10 mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，混匀，经0.45μm微孔滤膜过滤后，待液相色谱测定；（3）测定：（a）高效液相色谱条件：色谱柱：碳水化合物分析柱5μm，250 mm×4.6 mm（i.d），流动相：乙腈+水（体积比 4∶1）；流速：1.5 m L/min；柱温：30℃；进样量：15μL；检测器池温度：35℃；（b）标准曲线绘制：准确吸取蔗糖标准储备液 0.2 m L、1.0 m L、2.0 m L、4.0 m L、8.0 m L，用乙腈水溶液（体积比1∶1） 定容至 10 m L，此标准系列的质量浓度为0.5 mg/m L、2.5 mg/m L、5.0 mg/m L、10.0 mg/m L、20.0 mg/m L，经0.45μm 微孔滤膜过滤，浓度由低到高进样，以质量浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线；（d）定量测定：待测样液中蔗糖响应值应在标准曲线线性范围内，超出浓度线性范围则应稀释后再进样分析；（e）结果计算: 样品中蔗糖含量按下式进行计算。