[发明专利]检测人结核分支杆菌的电容式生物芯片的制备使用方法

摘要

本发明提供了一种检测人结核分支杆菌的电容式生物芯片的制备方法，从NCBI下载结核分枝杆菌、牛结核分枝杆菌和非洲结核分枝杆菌的全基因序列，选择能特异性识别MTBC的IS6110基因作为靶基因一，选择能区别牛型和人型结核分枝杆菌的ORF RD 11基因作为靶基因二；基于靶基因，选出六段碱基片段作为DNA探针1、2、3、4、5、6，并将各DNA探针基因固化到可变电容式微纳米生物检测芯片的极板一上，即得；其中，各DNA探针均为3’端修饰巯基后的碱基片段。本发明还提供了一种上述检测人结核分支杆菌的电容式生物芯片的使用方法。本发明芯片的检测范围广、检测时间短，且检测精密度较高，便于临床检验的开展。

主权项

1.一种检测人结核分支杆菌的电容式生物芯片的制备方法，其特征在于，从NCBI下载结核分枝杆菌、牛结核分枝杆菌和非洲结核分枝杆菌的全基因序列，比较三者基因差异，选择能特异性识别MTBC的IS6110基因作为靶基因一，选择能区别牛型和人型结核分枝杆菌的ORF RD 11基因作为靶基因二；接着从中选出六段碱基片段分别作为DNA探针1、2、3、4、5、6，再对各DNA探针的3’端进行巯基修饰；最后，将经巯基修饰后的各DNA探针基因以共价键结合的方式固化到可变电容式微纳米生物检测芯片的极板一上，即得目标所需的检测人结核分支杆菌的电容式生物芯片；其中，未经巯基修饰的各DNA探针的核苷酸序列具体如下：DNA探针1：序列如SEQ ID NO.1所示；DNA探针2：序列如SEQ ID NO.2所示；DNA探针3：序列如SEQ ID NO.3所示；DNA探针4：序列如SEQ ID NO.4所示；DNA探针5：序列如SEQ ID NO.5所示；DNA探针6：序列如SEQ ID NO.6所示；所述可变电容式微纳米生物检测芯片的结构具体包括极板一、极板二；所述极板一上设有若干个检测孔，检测孔底部通过一层弹性绝缘薄膜封底，被封底的检测孔内自底部覆有一层导体或半导体镀膜；所述极板二的上表面覆有一层与极板一检测孔面积相匹配的导体或半导体镀膜；上述各DNA探针基因以共价键结合方式固化的极板一位置即是极板一上，位于所述检测孔底部的导体或半导体镀膜上表面。