[发明专利]一种制备带有分子标签的二代测序接头的方法在审
申请号: | 201811245174.9 | 申请日: | 2018-10-25 |
公开(公告)号: | CN109295164A | 公开(公告)日: | 2019-02-01 |
发明(设计)人: | 郑贤杰;朱垚;曹振;曹欣茹;宋东亮 | 申请(专利权)人: | 翌圣生物科技(上海)有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6811 | 分类号: | C12Q1/6811 |
代理公司: | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人: | 冯子玲 |
地址: | 200120 上海市浦*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供一种制备带有分子标签的二代测序接头的方法,包括:步骤一:合成接头序列,接头序列包含第一序列和第二序列,其中,所述第二序列包括:限制性内切酶的保护碱基和随机碱基的双链分子标签,以及酶切位点中的可变碱基,第一序列和第二序列中具有互补的序列片段,步骤二:接头序列退火,混匀第一序列和第二序列,在退火体系中按退火程序退火形成双链,步骤三:补齐步骤二中所形成的双链的接头,步骤四:酶切回收接头。本发明的制备带有分子标签的二代测序接头的方法,具有如下优势:接头中含有更长的双链分子标签,为生息分析提供更好的信息基础;可以有效、较经济实惠地合成获得;适用于多种测序平台。 | ||
搜索关键词: | 退火 分子标签 接头序列 测序 制备 双链分子 碱基 双链 标签 合成 限制性内切酶 测序平台 酶切位点 随机碱基 退火程序 信息基础 序列片段 可变 补齐 混匀 酶切 回收 分析 | ||
【主权项】:
1.一种制备带有分子标签的二代测序接头的方法,其特征在于,包括:步骤一:合成接头序列,接头序列包含第一序列和第二序列,其中,所述第二序列包括:限制性内切酶的保护碱基和随机碱基的双链分子标签,以及酶切位点中的可变碱基,第一序列和第二序列中具有互补的序列片段,步骤二:接头序列退火,混匀第一序列和第二序列,在退火体系中按退火程序退火形成双链,步骤三:补齐步骤二中所形成的双链的接头,步骤四:酶切回收接头。
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