[发明专利]基于竞争性识别的荧光传感器的构建方法及应用

摘要

本发明公开了一种基于竞争性识别的荧光传感器的构建方法，该方法首先采用温和的水热反应制备阳离子柱[6]芳烃/还原氧化石墨烯复合材料CP6@rGO；CP6和rGO之间通过π‑π堆积和静电相互作用形成受体，荧光染料分子 RhB 首先结合受体材料发生荧光共振能量转移致荧光猝灭，然后当竞争分析物胰岛素加入其中时，荧光染料分子将会被分析物所替代，使RhB的荧光强度恢复；利用胰岛素使RhB荧光强度恢复这样的荧光变化信号来定量检测胰岛素，本发明克服了现有技术的胰岛素检测方法过于复杂、检测速度慢及对胰岛素识别性较低的缺陷；本发明方法简单、方便、快速、可控性高、高效，适于工业化生产及具有广阔的市场应用前景。

主权项

1.一种基于竞争性识别的荧光传感器的构建方法，其特征在于，步骤如下：（1）将氢醌二（2‑羟基乙基）醚、三苯基膦、无水乙腈依次放入烧瓶中，用冰水浴冷却，搅拌混匀后，加入四溴化碳，室温下搅拌反应，待反应完全后向混合物中加入冷水淬灭反应，得到白色沉淀，过滤收集沉淀物，用甲醇水溶液洗涤3~4次，用甲醇重结晶，干燥后制得化合物1，其中氢醌二（2‑羟基乙基）醚与三苯基膦的质量比为0.1~1:1，氢醌二（2‑羟基乙基）醚与四溴化碳的质量比为0.1~0.5:1；（2）将化合物 1、多聚甲醛加入到烧瓶中，用氯仿作为溶剂，然后向其中加入三氟化硼乙醚，氮气条件下室温搅拌反应，反应完全后加水淬灭，萃取并收集有机相，无水硫酸钠干燥有机相后，减压浓缩除去溶剂得到粗产品；粗产品经硅胶柱层析分离纯化得到白色固体2；其中化合物 1与多聚甲醛的质量比为10~50:1，化合物1与三氟化硼乙醚的质量比为0.5~2:1；（3）将乙醇、化合物2、三甲胺加入到烧瓶中，加热回流反应12~48 h，反应结束后冷却至室温，减压浓缩除去溶剂，残留固体溶于水中，过滤除去不溶物质，所得滤液经减压浓缩得到白色固体阳离子柱[6]芳烃，其中化合物2与三甲胺的质量比为100~150:1；（4）在水中加入氧化石墨烯、阳离子柱[6]芳烃，超声混匀后氢氧化钠调节混合溶液pH至12，然后将调好 pH 的溶液转移至烧瓶中，加热回流反应3~5 小时，反应结束后冷却至室温，离心，沉淀用超纯水离心清洗3~4次，制得基于竞争性识别的荧光传感器。