[发明专利]一种检测EGFR基因T790M突变的PCR试剂盒及其检测方法

摘要

本发明涉及基因突变检测领域，公开了一种检测EGFR基因T790M突变的PCR试剂盒，包括核酸扩增试剂和对照品，所述核酸扩增试剂包括EGFR T790M反应液，所述反应液中含有用于检测EGFR基因T790M突变的特异性引物和荧光探针，所述反应液中还包含一对上游引物和下游引物以及MGB荧光探针；所述核酸扩增试剂还包括2×QuantStudio 3D Digital PCR Mix。本发明还公开了上述检测EGFR基因T790M突变的PCR试剂盒的检测方法的检测方法。本申请的试剂盒采用数字PCR技术，可对非小细胞肺癌患者组织或血浆DNA样本中的T790M突变进行定量检测，从而辅助患者的靶向用药治疗方案的制定。

主权项

1.一种检测EGFR基因T790M突变的PCR试剂盒，其特征在于，包括核酸扩增试剂和对照品，所述核酸扩增试剂包括反应液，所述反应液中含有用于检测EGFR基因T790M突变的特异性引物和荧光探针，所述特异性引物还包含一对上游引物和下游引物，所述荧光探针为MGB荧光探针，所述MGB荧光探针还包括野生型探针和突变型探针；所述特异性引物和荧光探针的序列与修饰如下：上游引物    5’‑ACGTGTGCCGCCTGCT‑3’下游引物    5’‑TTGTGTTCCCGGACAT‑3’野生型探针  5’‑FAM‑TCATCACGCAGCTC‑MGB‑3’突变型探针  5’‑FAM‑TCATCATGCAGCTC‑MGB‑3’；所述核酸扩增试剂还包括2×QuantStudio 3D Digital PCR Mix。