[发明专利]一种基于MIX抗原包被的HCV NS3抗体检测方法在审
| 申请号： | 201811287913.0 | 申请日： | 2018-10-31 |
| 公开（公告）号： | CN109444424A | 公开（公告）日： | 2019-03-08 |
| 发明（设计）人： | 乔伟振;李另另;乔简 | 申请（专利权）人： | 无锡市人民医院 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/576 |
| 代理公司： | 北京商专永信知识产权代理事务所(普通合伙) 11400 | 代理人： | 高之波 |
| 地址： | 214000 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 发明提出了一种基于MIX抗原包被的HCV NS3抗体酶免疫法检测方法，包被:分别将HCV NS3(1型和6型)MIX抗原用0.01mol/LPBS(pH 7.2)稀释后包被微孔板，100μl/孔，放置4℃冰箱过夜，次日用1×PBST液洗涤3次，扣干密封，4℃储存备用；加样：将稀释的酶标二抗(羊抗人‑IgG)加入酶标孔，100μl/孔，再依次加入1μl血清标本，分为空白对照组、阴性对照组和阳性对照组、待测血清，轻拍混匀；温育：置37℃温育1小时；基于目前国内HCV抗体检测试剂仍不够完善的现状，结合中国本土HCV基因型分布的特点，建立一种以MIX抗原包被的HCV NS3酶免疫法抗体检测方法，以提高HCV抗体的检出率，从而减少HCV感染者的漏检。 | ||
| 搜索关键词： | 抗原包被 酶免疫 稀释 包被 温育 空白对照组 阳性对照组 阴性对照组 检测试剂 抗体检测 酶标二抗 血清标本 干密封 检出率 酶标孔 微孔板 检测 抗原 血清 混匀 加样 漏检 羊抗 洗涤 备用 冰箱 储存 | ||
【主权项】：
1.一种基于MIX抗原包被的HCV NS3抗体酶免疫法检测方法，其特征在于，(1)包被:分别将HCV NS3(1型和6型)MIX抗原用0.01mol/LPBS(pH 7.2)稀释后包被微孔板，100μl/孔，放置4℃冰箱过夜，次日用1×PBST液洗涤3次，扣干密封，4℃储存备用；(2)加样：将稀释的酶标二抗(羊抗人‑IgG)加入酶标孔，100μl/孔，再依次加入1μl血清标本，分为空白对照组、阴性对照组和阳性对照组、待测血清，轻拍混匀；(3)温育：置37℃温育1小时；(4)洗涤：弃去孔内液体，PBST液洗涤4遍，扣干；(5)显色：分别向空白对照组、阴性对照组和阳性对照组、待测血清的每孔加底物A液、底物B液各50μl，轻拍混匀，置37℃温育10分钟；(6)加入终止液50μl，轻拍混匀；(7)测定：酶标仪以空白对照孔调零，在波长450nm处测定各孔OD450值，打印测定结果；(8)结果判定标准：采用比率表示法：用测定标本孔的OD450与阴性标本测定孔OD450(当阴性标本测定孔OD450<0.06时以0.06计)的比值(P/N)表示，当P/N>2.1时判为阳性，否则为阴性。
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