[发明专利]一种复方菝葜颗粒UPLC指纹图谱的建立方法

摘要

本发明公开了一种复方菝葜颗粒UPLC指纹图谱的建立方法及其指纹图谱与应用，其包括以下步骤：(1)样品的制备：①供试品溶液配制；②混合对照品溶液配制；(2)复方菝葜颗粒提取物UPLC指纹图谱：将供试品溶液和混合对照溶液，各取2μL，分别注入UPLC色谱分析，在设定色谱条件进行测定，记录38min的色谱图，得到指纹图谱。本发明建立了复方菝葜颗粒的UPLC指纹图谱，与HPLC相比UPLC在保证复方菝葜颗粒提取物获得良好的分离的同时大大缩短了其指纹图谱分析时间。本发明的复方菝葜颗粒的指纹图谱成分保留完整，具有18个共有峰，且对其进行了指认和归属分析，各特征峰分离效果较好，能够较全面的反映出产品的质量信息，有利于全面监控产品质量，及鉴别产品的真伪。

主权项

1.一种复方菝葜颗粒UPLC指纹图谱的建立方法，包括以下步骤：(1)样品的制备①供试品溶液配制：精密称取批复方菝葜颗粒1.0g，加甲醇定容至10mL，密闭，超声溶解，放冷，甲醇补足失重，摇匀，滤过，取滤液用0.22μm滤膜滤过，得到供试品溶液；②混合对照品溶液配制：取绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异槲皮苷、金丝桃苷、落新妇苷、3,4‑二咖啡酰奎宁酸、3,5‑二咖啡酰奎宁酸，4,5‑二咖啡酰奎宁酸对照品适量，加适量甲醇制成含绿原酸90μg/mL、新绿原酸102.7μg/mL、隐绿原酸72.8μg/mL、金丝桃苷101.8μg/mL、落新妇苷133μg/mL、异槲皮苷104.8μg/mL、3,4‑二咖啡酰奎宁酸217.8μg/mL、3,5‑二咖啡酰奎宁酸93.2μg/mL，4,5‑二咖啡酰奎宁酸95.5μg/mL的混合对照溶液；(2)复方菝葜颗粒提取物UPLC指纹图谱将步骤1)中的供试品溶液和混合对照溶液，各取2μL，分别注入UPLC色谱分析，按照以下色谱条件进行测定，记录38min的色谱图，得到指纹图谱；色谱条件为：色谱柱为EC‑C18：3.0mm×50mm，2.7μm；检测波长280nm；柱温25℃；体积流量0.6ml/min；进样量2ul；流动相为A为甲醇，流动相B为0.3％甲酸水；梯度洗脱：0～2min，2％A，98％B；2～5min，2％～7％A，93％～98％B；5～12min，7％～11％A，89％～93％B；12～15min，11％～14％A，86％～89％B；15～17min，14％～16％A，84％～86％B；17～18min，16％～18％A，82％～84％B；18～20min，18％～20％A，80％～82％B；20～21min，20％～24％A，76％～80％B；21～24min，24％～26％A，74％～76％B；24～28min，26％～28％A，72％～74％B；28～29min，28％A，72％B；29～30min，28％～31％A，69％～72％B；30～35min，31％～48％A，52％～69％B；35～38min，48％A，52％B。