[发明专利]一种聚氨酯泡沫固定化纤维素酶酶促京尼平苷转化工艺

摘要

本发明中，将单元开孔的聚氨酯泡沫作为固定化纤维素酶的载体，获得了一种聚氨酯泡沫固定化纤维素酶酶促京尼平苷转化工艺，使得纤维素酶以包埋的形式固定于聚氨酯泡沫的孔单元中，通过发泡材料及用量的优化控制开孔率及孔径尺寸从而控制纤维素酶与底物的接触面积，保证一定的京尼平苷转化率的情况下，增大加了纤维素酶重复使用次数及使用效率。实验结果表明，经7次循环使用后，聚氨酯泡沫固定化纤维素酶的京尼平苷累积转化率为等质量游离纤维素酶的413.3％，并且该工艺适用的酶和糖苷可选范围很大，可根据所需转化的糖苷的不同，选择固定化不同的转化酶。此外，本工艺所用到的仪器设备简单、且操作简便、制备成本低、易于扩大产业化。

主权项

1.一种聚氨酯泡沫固定化纤维素酶酶促京尼平苷转化工艺，包括以下步骤：将任何方法提取所得的纤维素酶粉末，加入适宜比例的去离子水、多元醇、表面活性剂、二月桂酸二丁基锡的聚氨酯发泡材料中混合均匀，加入一定比例的二苯基甲烷二异氰酸酯后，在20℃水浴中、转速为500r/min的机械搅拌条件下搅拌20s，然后在室温下固化24h，即可得到聚氨酯泡沫固定化纤维素酶。将制备好的固定化纤维素酶，在适宜的温度、pH的条件下，直接放置于京尼平苷水溶液中，进行酶促反应70min，取出固定化纤维素酶，高温法使溶液中的酶失活后，过滤膜并用高效液相色谱法测定生成的京尼平溶液浓度，计算京尼平苷转化率。