[发明专利]一种新kappa-卡拉胶寡糖单体的制备方法在审
申请号: | 201811386281.3 | 申请日: | 2018-11-20 |
公开(公告)号: | CN109536548A | 公开(公告)日: | 2019-03-29 |
发明(设计)人: | 高芹芹;赵峡;张斌;管昶;王丽丽;岳帆 | 申请(专利权)人: | 青岛博智汇力生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P19/14 | 分类号: | C12P19/14;C12P19/04;C12P19/12;C12P19/00 |
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地址: | 266000 山东省青岛市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种新kappa‑卡拉胶寡糖单体的制备方法,属于海藻寡糖提取技术领域。具体步骤如下:(1)制备卡拉胶酶解液;(2)酶解法降解kappa‑卡拉胶制备卡拉胶寡糖;(3)将酶解制得的新kappa‑卡拉胶寡糖溶解后微孔滤膜过滤,用Bio‑Gel‑P6fine凝胶柱进行分离,按洗脱峰合并收集,浓缩,然后冷冻干燥,共得新kappa‑卡拉胶二糖至十四糖7种单体寡糖。本发明采用酶法降解,使得制备过程简单快捷、条件温和产物得率高、质量稳定,能够一次性得到新kappa‑卡拉胶二糖至十四糖,弥补了现有技术的不足,特别是可以提供高聚合度kappa‑卡拉胶寡糖的标准品,即新kappa‑卡拉胶十糖至十四糖,可为构效关系和应用研究提供足量的高纯度新kappa‑卡拉胶寡糖单体。 | ||
搜索关键词: | 卡拉胶 制备 寡糖单体 寡糖 二糖 微孔滤膜过滤 单体寡糖 高聚合度 构效关系 海藻寡糖 酶法降解 应用研究 制备过程 质量稳定 标准品 高纯度 酶解法 酶解液 凝胶柱 洗脱峰 一次性 得率 降解 酶解 足量 溶解 浓缩 合并 | ||
【主权项】:
1.一种新kappa‑卡拉胶寡糖单体的制备方法,其特征在于具体包括以下步骤:(1)新kappa‑卡拉胶寡糖的降解制备:用0.01‑1mol/L的Na2HPO4·12H2O将kappa‑卡拉胶配置为浓度为0.5%‑2%的溶液,35‑60℃加热搅拌使之完全溶解;将制备好的kappa‑卡拉胶酶与kappa‑卡拉胶溶液按照1:7‑10的比例混合,30‑50℃水浴加热搅拌5‑10min;将酶解后的液体100℃灭活10‑20min;酶解的产物5000‑1200r/min高速离心5‑15min,真空冷冻干燥后的kappa‑卡拉胶寡糖粉末;(2)新kappa‑卡拉胶寡糖单体的分离纯化:将酶解制得的新kappa‑卡拉胶寡糖用0.01‑1mol/ml的盐溶液溶解,溶解液用孔径为0.22um的微孔滤膜过滤;以0.01‑1mol/ml的盐溶液为流动相,用Bio‑Gel‑P6fine凝胶柱进行分离,按洗脱峰合并收集,浓缩,然后冷冻干燥即得,共得新kappa‑卡拉胶二糖至十四糖7种单体寡糖。
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