[发明专利]一种裂褶菌液体菌种的培养方法

摘要

一种裂褶菌液体菌种的培养方法，本发明方法是先制作裂褶菌种子液，再制作裂褶菌液体培养基，然后将将培养好的裂褶菌种子液按照裂褶菌液体培养基体积的2％接种至裂褶菌液体培养基；接种结束后，将摇瓶置于摇床上培养，培养条件为转速130r/min，温度24℃±1℃，避光培养3‑4d，得到菌丝密度好且均匀的裂褶菌液体菌种。本发明的液体培养基可将裂褶菌液体菌种培养时间缩短至3‑4d，且菌丝密度好、均匀、性状稳定。本发明方法操作简单，对设备投入要求不高，可大大降低生产成本，易于推广实施。

主权项

1.一种裂褶菌液体菌种的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制作裂褶菌种子液，方法如下：1)母种活化：将保存在冰箱中的裂褶菌母种转接到母种培养基上，25℃±1℃避光培养6‑7d备用；2)液体配制：按照马铃薯160～240g、葡萄糖18～22g、蛋白胨1～3g、水1000ml，装于摇瓶中，搅拌均匀；3)灭菌及接种：按照121℃，恒温恒压维持25min的灭菌标准对配制的液体进行灭菌，灭菌完成后，将摇瓶置于超净工作台上冷却；挑取菌丝强壮、洁白、无其他杂菌污染的裂褶菌母种接入摇瓶；4)培养：将接种后的摇瓶置于磁力搅拌器上培养，培养温度24℃±1℃，避光培养3‑4d，得裂褶菌种子液；(2)制作裂褶菌液体培养基，方法如下：1)配制以下四种培养基液体供选用：麸皮液体培养基：麸皮10～30g,葡萄糖10～20g,蛋白胨1～3g,KH2PO41～3g,MgSO41～2g，麸皮加1000ml水煮沸至10min，液体颜色呈小麦色后过滤，将葡萄糖、蛋白胨、KH2PO4,MgSO4加入滤液，搅拌均匀后装入摇瓶中；玉米粉液体培养基：玉米粉20g,葡萄糖15g,蛋白胨2g,KH2PO42g,MgSO41.5g,水1000ml；装于摇瓶中，搅拌均匀；黄豆粉液体培养基：黄豆粉20g,葡萄糖15g,蛋白胨2g,KH2PO42g,MgSO41.5g,水1000ml；装于摇瓶中，搅拌均匀；马铃薯液体培养基：去皮马铃薯100g,葡萄糖15g,蛋白胨2g,KH2PO42g,MgSO41.5g,水1000ml；装于摇瓶中，搅拌均匀；2)灭菌：按照121℃，恒温恒压维持25min的灭菌标准对配制的培养基液体进行灭菌，灭菌完成后，置于超净工作台上冷却，即得裂褶菌液体培养基；(3)裂褶菌种子液接种：将培养好的裂褶菌种子液按照裂褶菌液体培养基体积的2％接种至裂褶菌液体培养基；(4)培养：接种结束后，将摇瓶置于摇床上培养，培养条件为转速130r/min，温度24℃±1℃，避光培养3‑4d，得到菌丝密度好且均匀的裂褶菌液体菌种。