[发明专利]一种地柏枝的组织培养快繁方法

摘要

本发明公开了一种地柏枝的组织培养快繁方法，地柏枝为多年生草木，产于湖北、陕西、广西等长江以南大部份地区。生于山间、林荫等阴湿处味甘、辛，性平。具有止血，清热，利湿等作用。目前，地柏枝种苗主要通过种子和扦插方式繁育，存在周期长、成本高、效率低下等问题。因此，本发明以带节茎段为外植体，通过不定芽诱导、增殖、生根、炼苗移栽等过程成功获得了地柏枝离体再植株，建立地柏枝组织培养快速繁殖技术体系，对于进行优良品种的快速繁殖和大面积推广、促进的产业化发展具有重要意义。

主权项

1.一种地柏枝的组织培养快繁方法，其特征在于包括以下工艺步骤：步骤1，诱导不定芽：选取地柏枝当年生带节藤茎为外植体,经75%酒精消毒29秒种后，用无菌水冲洗11次后置于0.1%的升汞溶液中消毒40分钟，然后用无菌水冲洗8次，经无菌滤纸吸干水分后剪切成8cm左右的带节藤茎，并接种到诱导培养基上,于25～28℃条件下全暗培养，直至诱导形成不定芽；诱导培养基为：MS+1.6mg/LTDZ+3.0mg/L 6‑BA+0.8mg/LNAA+38g/L蔗糖+8.1g/L琼脂，pH为5.2；步骤2，继代培养：将步骤1获得的不定芽从基部切下，接种到增殖培养基上进行继代培养，接种后置于每天光照16小时，光照强度为2700lx，培养温度为25～28℃的条件下培养，38天转接一次；增殖培养基为：MS+3.1mg/L 6‑BA+0.9mg/LNAA+40g/L蔗糖+8.1g/L琼脂，pH为5.2；步骤3，生根培养：将步骤2继代培养长至8cm的不定芽分切并接种到生根培养基上进行诱导生根，接种后先在25～28℃条件下全暗培养12天，然后置于每天光照12小时，光照强度为3400lx，培养温度为25～28℃的条件下培养至生根；生根培养基为：1/2MS+1.0mg/LIBA+3.0mg/L GGR+38g/L蔗糖+7.0g/L琼脂，pH为5.2；步骤4，炼苗移栽：将长至10cm的生根试管苗的培养瓶瓶盖打开并置于自然光照下炼苗11天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由泥炭土:农家肥:河沙=6：3：1混合成的基质中并定植于大田中。