[发明专利]一种板蓝根离体培养技术

摘要

本发明公开了一种板蓝根离体培养技术，板蓝根为十字花科植物，主产于江苏、河北、河南、陕西，全国各地有产。秋季挖根，除去茎叶，清洗泥土，晒干。气微，味微甜而后苦涩。具有清热解毒，凉血消斑。用于温病热盛，斑疹，吐血，咯血。板蓝根通过植物细胞培养技术获得单倍体的育种方法。本发明以板蓝根为外植体，经过外植体预处理、愈伤组织诱导、不定芽分化、生根培养、炼苗移栽等过程从而建立了板蓝根离体培养技术体系，为开展板蓝根新品种选育提供新材料。

主权项

1.一种板蓝根离体培养技术，其特征在于包括以下步骤：步骤1，花蕾选择及处理：晴朗天气早上取健壮植株上的花蕾，用改良品红染色镜检花粉发育时期，选择小孢子发育处于单核靠边期的花粉作为外植体,花蕾采摘后先在5℃条件下进行低温预处理5天后备用；步骤2，花愈伤组织诱导：将步骤1处理后的花蕾先用洗洁精水溶液浸泡10min，然后用自来水冲洗30min，擦干表面水分后在超净工作台中以70%乙醇浸泡10s，0.1%升汞溶液消毒20min，再用无菌水清洗5次后置于无菌滤纸上用已消毒的镊子和解剖针剖开花蕾，取出花药并接种于花药诱导培养基上进行愈伤组织诱导,接种后置于每天光照15小时，光照强度为1500lx，培养温度为27℃的条件下培养直至形成愈伤组织；花诱导培养基为：MS+0.45mg/L6‑BA+4mg/L2,4‑D+3.5%蔗糖+0.35%琼脂+0.25%活性炭，pH值为5.8;步骤3，不定芽分化：将步骤2形成的愈伤组织转接于分化培养基中进行不定芽分化诱导,接种后先在27℃条件下全暗培养6天，然后置于每天光照12小时，光照强度为2500lx，培养温度为27℃的条件下培养直至形成不定芽；分化培养基为：MS+6mg/L KT+3mg/L NAA+21mg/L AgNO3+3.5%蔗糖+0.5%琼脂+0.3%活性炭，pH值为5.8;步骤4，生根培养：将步骤3所获得的高度约为4cm的不定芽切割并接种到生根培养基上进行生根培养，接种后先在27℃条件下全暗培养7天，然后置于每天光照14小时，光照强度为2800lx，培养温度为27℃的条件下培养至生根；生根培养基为：1/2MS+2mg/L NAA+3mg/LIBA+4.0%蔗糖+0.9%琼脂+0.7%活性炭，pH值为5.8;步骤5，炼苗移栽：待幼苗长至几条短的白根后置于自然光照下炼苗8天后，洗净根部培养基，移栽由营养土：沙土：蛭石=3:2:1混合成的基质,置于光照培养箱内培养，每天以1/4MS大量元素营养液给幼苗浇水，保持湿度,待幼苗成活后再移栽大田。