[发明专利]一种DNA聚合酶的相对酶活的测定方法有效

专利信息
申请号: 201811432168.4 申请日: 2018-11-28
公开(公告)号: CN109609606B 公开(公告)日: 2023-03-31
发明(设计)人: 牟禹;张冠斌;陆波;王科;安爽 申请(专利权)人: 成都博奥晶芯生物科技有限公司
主分类号: C12Q1/6851 分类号: C12Q1/6851;C12Q1/48
代理公司: 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 代理人: 王学强
地址: 611135 四川省*** 国省代码: 四川;51
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摘要: 发明公开了一种DNA聚合酶的相对酶活的测定方法。将待测的DNA聚合酶与对照酶在相同的实时荧光定量PCR反应体系中分别同时进行扩增反应,反应结束后以待测组和对照组得到的CT值进行一阶曲线拟合,根据拟合曲线的K值判定是否需要调节待测酶在反应体系中的工作浓度并再次进行实时荧光定量PCR反应,直到K值满足预先设定值要求、且曲线相关系数R2满足相关性要求时,依据此次待测酶和对照酶在反应体系中的工作浓度,计算待测酶相比于对照酶的相对酶活。该方法耗时短、成本低、无需专业设备和人员,能有效解决因批次间酶活差异导致的科研实验的结果异常、以及规模化生产中分子诊断试剂盒出现的批间差异。
搜索关键词: 一种 dna 聚合 相对 测定 方法
【主权项】:
1.一种DNA聚合酶的相对酶活的测定方法,其特征在于,包括:将待测的DNA聚合酶与对照酶在相同的实时荧光定量PCR反应体系中分别同时进行扩增反应,反应结束后以待测组和对照组得到的CT值进行一阶曲线拟合,根据拟合曲线的K值判定是否需要调节待测酶在反应体系中的工作浓度并再次进行实时荧光定量PCR反应,直到K值满足预先设定值要求、且曲线相关系数R2满足相关性要求时,依据此次待测酶和对照酶在反应体系中的工作浓度,计算待测酶相比于对照酶的相对酶活。
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