[发明专利]一种可催化西他沙星五元环关键中间体的ω-转氨酶突变体

摘要

本发明公开了一种可催化西他沙星五元环关键中间体的ω‑转氨酶突变体，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过将ω‑转氨酶32位置处的Y突变成L，159位置处的Y突变成F，252位置处的T突变成A，得到了一种可以催化西他沙星五元环关键中间体的ω‑转氨酶突变体。本发明突变体Y32L/Y159F/T252A催化效率Kcat/Km为0.75min‑1·mM‑1，催化(S)‑5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑amine生成5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑one时，突变体的5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑one最大转化率为78.95％。本发明得到的突变体适用于在工业上手性合成西他沙星五元环关键中间体的应用。

主权项

1.一种催化效率提高的ω‑转氨酶突变体，其特征在于，所述突变体的氨基酸序列包括：在SEQ ID NO:1的氨基酸序列的基础上，同时将第32位置的酪氨酸突变成亮氨酸、第159位置的酪氨酸突变成苯丙氨酸、第252位置的苏氨酸突变成丙氨酸，而得到的氨基酸序列。