[发明专利]一种能够催化西他沙星五元环中间体的ω-转氨酶突变体

摘要

本发明公开了一种能够催化西他沙星五元环中间体的，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过对ω‑转氨酶晶体结构中B因子较高的氨基酸进行定点突变，即将ω‑转氨酶212位置处的L突变成M，215位置处的I突变成M，得到了一种可以催化西他沙星五元环关键中间体的ω‑转氨酶突变体。本发明突变体L212M/I215M催化效率Kcat/Km为0.64min‑1·mM‑1，催化(S)‑5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑amine生成5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑one时，突变体的5‑benzyl‑5‑azaspiro[2.4]heptan‑7‑one最大转化率为77.37％。本发明得到的突变体适用于在工业上手性合成西他沙星五元环关键中间体的应用。

主权项

1.一种ω‑转氨酶突变体，其特征在于，所述突变体的氨基酸序列包括：在SEQ ID NO:1的氨基酸序列的基础上，同时将第212位置的亮氨酸突变成甲硫氨酸、第215位置的异亮氨酸突变成甲硫氨酸，而得到的氨基酸序列。