[发明专利]银丹心脑通软胶囊中主要效应成分的检测方法

摘要

本发明公开了银丹心脑通软胶囊中主要效应成分的检测方法,按照重量计算，银丹心脑通软胶囊是用银杏叶500g、丹参500g、灯盏细辛300g、绞股蓝300g、山楂400g、大蒜400g、三七200g、艾片10g制成1000粒胶囊剂，检测方法包括黄酮类成分、酚酸类成分等的定量分析，所述定量分析方法为高效液相色谱质谱联用法。本发明中银丹心脑通软胶囊中主要成分定量分析的灵敏度更高、精确度好、鉴别能力强，可检出的成分多，检测数据准确度好；银丹心脑通软胶囊的定性分析的批间相似度好，可以更好地反映银丹心脑通软胶囊的整体化学轮廓。

主权项

1.银丹心脑通软胶囊中主要效应成分的检测方法,按照重量计算，银丹心脑通软胶囊是用银杏叶500g、丹参500g、灯盏细辛300g、绞股蓝300g、山楂400g、大蒜400g、三七200g、艾片10g制成1000粒胶囊剂，其特征在于：包括黄酮类成分和酚酸类成分的定量分析，所述黄酮类成分为，蝶豆素，芦丁，异槲皮苷，野黄芩苷，山奈酚‑7‑O‑葡萄糖苷，槲皮素‑3‑O‑葡萄糖‑7‑O‑鼠李糖苷，山奈酚‑3‑O‑芸香糖苷，水仙苷，芹菜素‑7‑O‑葡萄糖苷，异鼠李素‑3‑O‑葡萄糖苷，芹菜素‑7‑O‑葡萄糖醛酸苷，杨梅素，槲皮素‑3‑(6‑对香豆酰葡萄糖基‑p‑1,4‑鼠李糖甙，野黄芩素，山柰酚‑3‑(6‑对香豆酰葡萄糖基‑p‑1,2‑鼠李糖苷，山奈酚，槲皮素，芹菜素，木犀草素和异鼠李素，所述酚酸类成分为，枸橼酸，没食子酸，丹参素，儿茶素，原儿茶酸，绿原酸，原儿茶醛，隐绿原酸，咖啡酸，表儿茶素，异绿原酸B，迷迭香酸，紫草酸，丹酚酸B，丹酚酸A，丹酚酸D和丹酚酸C,所述黄酮类成分和酚酸类成分的定量分析方法为，标准品溶液和内标溶液的制备：称取各黄酮类成分和酚酸类成分的标准品，分别用75％的甲醇水溶液制备成混合标准品母液；称取柚皮苷，用90％的甲醇水溶液制成终浓度为25.6μg/mL的内标溶液；混合标准品母液中加入内标溶液后用75％的甲醇制成系列浓度的混合对照品工作液，所述混合对照品工作液中柚皮苷的终浓度为2.56μg/mL，所述系列浓度为混合对照品工作液中各黄酮类成分和酚酸类成分标准品的终浓度；以上所配溶液分析前均于‑20℃保存；样品溶液的制备：将银丹心脑通软胶囊样品除去胶囊壳，称取除去胶囊壳后的银丹心脑通软胶囊样品0.6g至100mL锥形瓶中，加入60mL的75％的甲醇水溶液，于100Hz下超声30min；冷却至室温，用75％的甲醇水溶液补足失重；于13000rpm/min离心10min，取上清转移到1.5mL离心管中，于‑20℃保存；分析前将上清稀释10倍，加入内标溶液，内标溶液加入后柚皮苷终浓度为2.56μg/mL，离心取上清待分析；检验设备：高效液相色谱‑三重四级杆串联质谱系统；色谱条件：负离子模式检测，采用多重反应监测(multiple reaction monitoring，MRM)模式进行定量分析，Zorbax Eclipse Plus C18，150×4.6cm、1.8μm；流动相：A相为0.1％的甲酸水溶液，B相为甲醇溶液；洗脱程序为：0min，10％B；3min，45％B；10min，45％B；18min，90％B，21min，90％B；22min，10％B；28min，10％B；流速为0.3mL/min；柱温为30℃；进样量为2μL；质谱条件：雾化器流速为3L/min，气体温度为350℃，加热器和干燥器流速皆为10L/min，DL温度为250℃，界面温度为300℃，界面电压为4000V；含量测定：分析系列浓度的混合对照品工作液，建立各黄酮类成分和酚酸类成分的标准曲线，对银丹心脑通软胶囊样品进行测定，通过标准曲线计算样品中各黄酮类成分和酚酸类成分的含量。