[发明专利]一种酯化红曲的培养基的制备方法

摘要

本发明的一种酯化红曲的培养基的制备方法，属于生物工程技术领域。本发明以菜籽皮、菜籽粕和玉米粉为主要原料，通过试管斜面菌种的制备、三角瓶菌种的制备、生产用菌种的制备、准备发酵基料、拌种、打堆发酵、摊堆发酵、低温烘干的工艺步骤得到得酯化酶粗酶制剂，即为酯化红曲的培养基。本发明的一种酯化红曲的培养基的制备方法，可以提高红曲酯化力，工艺简单，成本低。

主权项

1.一种酯化红曲的培养基的制备方法，其特征在于，为下述步骤：(1)试管斜面菌种的制备，将分装有改良察氏琼脂的试管在高温高压下灭菌，在无菌条件下，将实验室筛选诱变获得的烟灰色红曲霉HN215‑6接种于试管中，在30～32℃培养48～52h，得到第一试管斜面菌种；(2)三角瓶菌种的制备，在500mL的三角瓶中加入大米培养基，在无菌条件下，接入1～5环步骤(1)中的第一试管斜面菌种，于30～32℃、200rpm条件下摇瓶培养48h～52h，得到第一三角瓶菌种；(3)生产用菌种的制备，向灭菌后的500L种子罐中加入大米培养基，在120～125℃温度下灭菌30min，待种子罐冷却至35～40℃时，按种子罐中物料体积总量的0.10～0.15％接入步骤(2)中的第一三角瓶菌种，在转速240rpm、温度32～34℃、灌压0.05～0.07Mpa、无菌空气流量8～10m3/h的条件下，培养48～72h得第一生产用菌种；(4)发酵用基料的准备，将菜籽皮、菜籽粕和玉米粉投入蒸料罐内，旋转混合时间10～15min，向蒸料罐内加水，料水质量比为1：0.4，然后在115‑130℃温度下蒸料30min，在常压和温度为90℃环境下凉料，得基料，将基料从蒸料罐内放出，转入发酵池，基料温度冷却至35～40℃，得冷却后基料，将冷却后基料中加入步骤(3)中的第一生产用菌种，按照每克基料的20～21mL第一生产用菌种来进行接种，混合拌种，按照每克基料加入0.1～0.12mL的乳酸来添加乳酸，然后温度维持32～35℃，得拌种基料；(5)发酵，将步骤(4)中的拌种基料堆厚40～50cm，表面覆以灭菌的麻袋，在室温下发酵培养10～15h，得发酵基料，当发酵基料的温度达到48～50℃时，摊薄发酵基料，摊薄至堆厚为15～20cm，在20～25℃下，通风维持内部温度为32～35℃，发酵培养3～5d，每天翻料一次，得发酵好的基料，将发酵好的基料在≤65℃温度下烘干至水分≤12％，得低温烘干基料；(6)烘干破碎，将低温烘干基料粉碎，细度为100％过40目，得酯化酶粗酶制剂，即为酯化红曲的培养基。