[发明专利]一种重组慢病毒载体、重组慢病毒及其应用

摘要

本发明公开一种重组慢病毒载体、重组慢病毒及其应用。本发明是在慢病毒载体多克隆位点的上游插入HSA信号肽，下游插入纯化标签6×His序列，得到改装的慢病毒载体，然后将6′His‑OPN片段插入到改装的慢病毒载体的XbaI和BamHI酶切位点之间得到重组慢病毒载体。本发明通过稳转CHO细胞系，纯化后得到OPN重组蛋白，表达时间和水平可以人为的控制，纯化便捷，结构更接近于天然蛋白，本身更加有活性，功能更全面。该蛋白加入到猪体外受精培养系中，可大大提高受精率，改善胚胎的发育。可进一步应用到猪精液中，提高种猪的繁殖率。此蛋白的出现会给猪场带来更好的发展前景，将养猪业推向新的发展阶段。

主权项

1.一种重组慢病毒载体，其特征在于：在慢病毒载体pCDH‑CMV‑MCS‑EF1‑GFP+Puro多克隆位点的上游插入HSA信号肽，下游插入纯化标签6×His序列，得到改装的慢病毒载体pCDH‑CMV‑HSA‑MCS‑6His‑EF1‑GFP+Puro，然后将6′His‑OPN片段插入到改装的慢病毒载体的XbaI和BamHI酶切位点之间，得到重组慢病毒载体pCDH‑CMV‑HSA‑6′His‑OPN‑6His‑EF1‑GFP+Puro；所述的HSA信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示；所述的6′His‑OPN片段的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。