[发明专利]一种HPLC等度洗脱同时测定决明子中4种成分的含量测定方法

摘要

本发明涉及一种HPLC等度洗脱同时测定决明子中4种成分的含量测定方法。其特征：以样品处理时间仅为文献1/9、有机溶剂仅为15％的方法得到供试品溶液，采用普通的色谱仪、等度洗脱方式，以体积比为49∶7∶44的乙腈‑甲醇‑0.1％磷酸为流动相，在222±1nm处，同时测定了样品中的橙黄决明素、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚含量，各波峰分离度符合要求，进样一针，35分钟出峰完毕。首次以普通的等度洗脱取代了一直实施的梯度洗脱；以无浓缩、萃取、蒸干的环保方法，取代了繁琐、费时、成本高、污染环境的报道方法；简便、快捷，精密度和准确度提升，实用范围扩大，测定成本降低，易于普及掌握。

主权项

1.一种HPLC等度洗脱同时测定决明子中4种成分的含量测定方法，其特征在于：A.色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为49∶7∶44的乙腈‑甲醇‑0.1％磷酸为流动相；检测波长：222nm；柱温为30℃；理论板数按橙黄决明素峰计算不低于6000；B.对照品溶液的制备 取在干燥器中干燥24小时的橙黄决明素、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚对照品适量，精密称定，加甲醇制成原液，再取原液适量，加90％甲醇制成每1ml含橙黄决明素0.009mg、大黄素0.004mg大黄酚0.015mg和大黄素甲醚0.004mg的混合溶液，作为对照品溶液；C.供试品溶液的制备 取决明子药材细粉0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积比为10∶1的甲醇‑盐酸溶液25ml，称定重量，置80℃的水浴中加热回流30分钟，放冷，若瓶壁有黏附，超声去除，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液3ml，置10ml的量瓶中，加2％的氢氧化钠溶液1.5ml，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；D.测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，分别计算4种成分的含量。