[发明专利]Gd:Fe3

摘要

本发明涉及一种Gd:Fe3O4@RA纳米粒子诱导神经干细胞定向分化为神经元细胞的实验方法，包括以下步骤：在培养板中放入预先用多聚赖氨酸处理的盖玻片，将来源于大鼠胚胎脑海马的原代和传代神经干细胞以1×107L‑1分别接种到培养孔中，神经干细胞完全培养液中去除碱性成纤维细胞生长因子，并添加1.0ml,浓度为1mg/ml的Gd:Fe3O4@RA复合纳米离子和体积分数为5％的胎牛血清促进神经干细胞分化，培养6天后，继续在含有体积分数为5％胎牛血清的神经干细胞培养基中培养6天，待细胞形态发育成熟后取出盖玻片。

主权项

1.一种Gd:Fe3O4@RA纳米粒子诱导神经干细胞定向分化为神经元细胞的实验方法，包括以下步骤：在培养板中放入预先用多聚赖氨酸处理的盖玻片，将来源于大鼠胚胎脑海马的原代和传代神经干细胞以1×107L‑1分别接种到培养孔中，神经干细胞完全培养液中去除碱性成纤维细胞生长因子，并添加1.0ml,浓度为1mg/ml的Gd:Fe3O4@RA复合纳米离子和体积分数为5％的胎牛血清促进神经干细胞分化，培养6天后，继续在含有体积分数为5％胎牛血清的神经干细胞培养基中培养6天，待细胞形态发育成熟后取出盖玻片；将载有常规贴壁分化培养和Gd:Fe3O4@RA复合纳米离子诱导分化培养的细胞的盖玻片各分为2组，分别神经元标志物标记的β‑微管蛋白(TUJ1)的免疫组化；随机选取N张片子作为样本，每个样本系统随机取N个视野，N为自然数，以荧光标记为阳性，按照下列公式计算出各个片子神经干细胞分化为神经元细胞的百分率：神经元细胞百分率＝(荧光标记阳性细胞数/细胞总数)×100％；将Gd:Fe3O4@RA复合纳米离子分化培养的神经干细胞与常规贴壁分化培养的神经干细胞比较。