[发明专利]一种产双高-γ-亚麻酸卷枝毛霉细胞工厂的构建方法及发酵技术

摘要

本发明涉及一种产双高‑γ‑亚麻酸卷枝毛霉细胞工厂的构建方法及发酵技术，属于基因工程领域，本发明从高山被孢霉克隆获得γ‑亚麻酸延长酶基因glelo，连接至整合型质粒pMAT1552上，转化到卷枝毛霉缺陷型菌株Mu402中，通过同源重组将glelo基因整合到卷枝毛霉的基因组上，得到重组菌株Mc‑glelo，最终实现了glelo基因在卷枝毛霉中的表达，重组菌株Mc‑glelo中油脂含量与对照菌Mc1552相比无显著差异，然而其油脂组成变化较大，而且在表达菌株Mc‑glelo油脂中出现双高‑γ‑亚麻酸（DGLA），其含量达到了总脂肪酸含量的5.7%。优化发酵条件并添加前体脂肪酸情况下，DGLA含量达7.6%。重组新菌种于2018年6月20日保藏在中国普通微生物菌种保藏管理中心。保藏中心给予该生物材料的保藏号为CGMCC No.15887，建议的分类命名Mucor circinelloides‑GLELO。

主权项

1.一种产双高‑γ‑亚麻酸卷枝毛霉细胞工厂的构建方法及发酵技术，其特征是，将从高山被孢霉菌株中克隆获得的γ‑亚麻酸延长酶基因glelo通过同源重组的方法转入卷枝毛霉得到卷枝毛霉重组菌株Mc‑glelo, 在优化的发酵工艺下发酵获得含量高达7.6% 的DGLA功能性脂质。