[发明专利]一种石斛护肤凝胶及其制备方法

摘要

一种石斛护肤凝胶的制备方法，包括以下步骤：a、制备诱导培养基，b、铁皮石斛原球茎的诱导培养，c、制备1/2Ms培养基，d、铁皮石斛原球茎的继代培养，e、制备增殖培养基，f、铁皮石斛原球茎的增殖培养，取步骤f得到的铁皮石斛原球茎，破碎后过滤得滤液，然后离心取上清液；在上清液中加入活性炭，然后抽滤，得到澄清的铁皮石斛原液；取上述铁皮石斛原液，按比例加入卡波姆940、透明质酸钠水溶液、丁二醇、尿囊素、甘草酸二钾、丙二醇、甘油、尼泊金甲酯和苯扎铵氯，搅拌均匀即可。本方法制备的石斛护肤凝胶，具有保湿、抗氧化、美白的功效，且对皮肤无刺激，性质温和。另外该方法步骤简单，操作方便，原料易得，适用于工业化生产。

主权项

1.一种石斛护肤凝胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)铁皮石斛原球茎的诱导和增殖培养：a、制备诱导培养基，以1L计算，称取4.74g的Ms培养基置于烧杯中，加入5～10mL蒸馏水，然后依次加入1.0～5.0mL浓度为0.1mg/mL的6‑苄基腺嘌呤、1.0～2.0mL浓度为0.1mg/mL的萘乙酸、30g蔗糖和8g琼脂粉，然后用蒸馏水定容至1L，搅拌、煮沸，待琼脂充分溶解后，用1mol/L的氢氧化钠溶液调节pH至6.0，分装入组培瓶中，并在121℃的高压灭菌锅中高压灭菌30min，冷却后得到诱导培养基备用；b、铁皮石斛原球茎的诱导培养，取新鲜铁皮石斛成熟的蒴果，用水冲洗干净，用体积分数为70％的乙醇溶液进行表面消毒后，再用无菌水冲洗干净，然后在浸入质量分数为0.1％的升汞溶液中15min，再用无菌水冲洗5‑6次，最后在超净台中将果实切开，将其中的种子均匀地洒在步骤a制备好的诱导培养基上，在23～27℃、光照强度为2000Lx、每天照射14h条件下，培养45天；c、制备1/2Ms培养基，以1L计算，称取2.37g的Ms培养基置于烧杯中，加入5～10mL蒸馏水，再加入30g蔗糖和8g琼脂粉，然后用蒸馏水定容至1L，搅拌、煮沸，待琼脂充分溶解后，用1mol/L的氢氧化钠溶液调节pH至6.0，分装入组培瓶中，加盖，并在121℃的高压灭菌锅中高压灭菌30min，冷却后得到1/2Ms培养基备用；d、铁皮石斛原球茎的继代培养，取步骤b得到的浅绿色的球型原球茎，在无菌条件下接入步骤c制备的1/2Ms培养基中，在23～27℃、光照强度为2000Lx、每天照射14h条件下，培养45天，重复上述步骤继代培养4～5次；e、制备增殖培养基，以1L计算，土豆洗净后削皮，称取50～100g，切成小块，置于锅中加入200～300mL的蒸馏水，煮沸5～10min，倒入榨汁机中打成浆状，四层50目纱布过滤，保留土豆汁过滤液备用；称取2.74～3.55g的Ms培养基置于烧杯中，倒入土豆汁过滤液，加入20g蔗糖和8g琼脂，然后用蒸馏水定容至1L，搅拌、煮沸，待琼脂充分溶解后，用1mol/L的盐酸调节pH值至6.0，然后分装入组培瓶中，加盖，并在121℃的高压灭菌锅中高压灭菌30min，冷却后得到增殖培养基；f、铁皮石斛原球茎的增殖培养，取步骤d得到的个体饱满，色泽为浅绿色的原球茎在无菌条件下接入步骤e制备的增殖培养基中，在23～27℃、光照强度为2000Lx、每天照射14h条件下，培养60天，收集培养得到的铁皮石斛原球茎，置于‑20℃的环境下保存备用；(2)铁皮石斛原液的制备：取步骤f得到的铁皮石斛原球茎，在室温下化冻并在10℃下利用榨汁机破碎原球茎，然后用四层50目的纱布过滤得滤液，然后将滤液置于离心机中以6000rpm离心10min后，取上清液；在上清液中加入颗粒状活性炭，添加量为每100mL上清液中加入1g颗粒状活性炭，颗粒状活性的炭粒径为0.2～0.5cm，然后再放入恒温振荡机在100rpm条件下振荡60min，用孔径为0.45μm的水相混合纤维素微孔滤膜抽滤，得到澄清的铁皮石斛原液；(3)石斛凝胶的制备：取步骤(2)所得铁皮石斛原液90～95mL，加入0.5～1.5g的卡波姆940，搅拌均匀，再依次加入5～10mL的质量分数为1％的透明质酸钠水溶液、0.5～2.0mL的丁二醇、0.01～0.03g的尿囊素、0.05～0.1g的甘草酸二钾、0.5～1.0mL的丙二醇、1～3mL的甘油、0.05～0.3g的尼泊金甲酯和0.05～0.3g的苯扎铵氯，搅拌均匀即可。