[发明专利]麦芽糖转录激活因子MalR的突变体文库构建筛选及其应用有效
| 申请号： | 201811532883.5 | 申请日： | 2018-12-14 |
| 公开（公告）号： | CN110592131B | 公开（公告）日： | 2021-10-22 |
| 发明（设计）人： | 张大伟;付刚 | 申请（专利权）人： | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N15/75 | 分类号： | C12N15/75;C40B50/06;C07K14/32 |
| 代理公司： | 天津市三利专利商标代理有限公司 12107 | 代理人： | 李蕊 |
| 地址： | 300308 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种以芽孢杆菌为出发菌株，利用荧光蛋白快速构建筛选麦芽糖转录激活因子MalR突变库的方法，同时筛选获得可降低麦芽糖启动子渗漏表达并提高其诱导表达强度的启动子突变体，从而有利于麦芽糖启动子在蛋白表达中的应用。 | ||
| 搜索关键词： | 麦芽糖 转录 激活 因子 malr 突变体 文库 构建 筛选 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种降低麦芽糖启动子渗漏表达并提高其诱导表达强度的方法，所述方法包括以下步骤：/n1)在出发菌株中敲除麦芽糖转录激活因子MalR；/n2)构建含有麦芽糖启动子PmalA，受麦芽糖启动子PmalA调控的蛋白基因，启动子HpaII以及受HpaII启动子调控的麦芽糖转录激活因子MalR基因的载体；/n3)对步骤2)所述载体中的麦芽糖转录激活因子MalR基因进行基因突变，构建获得MalR突变体文库；/n4)将步骤3)中的MalR突变体文库转化步骤1)所构建的菌株；/n5)对步骤4)所获得的菌株进行培养，筛选获得麦芽糖启动子渗漏表达降低同时诱导表达强度提高的MalR突变体。/n
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