[发明专利]一种抗体介导的痕量吡虫啉农药残留的PCR管式检测方法在审
| 申请号： | 201811540526.3 | 申请日： | 2018-12-17 |
| 公开（公告）号： | CN109666718A | 公开（公告）日： | 2019-04-23 |
| 发明（设计）人： | 冯从经;陈康康;张一强;王李宝;唐泰;刘旭;宋佳惠 | 申请（专利权）人： | 扬州大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6804 | 分类号： | C12Q1/6804;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人： | 薛海霞;董建林 |
| 地址： | 225009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种抗体介导的痕量吡虫啉农药残留的PCR管式检测方法,包括如下步骤：光敏PCR管壁处理；农药抗体与管壁结合；封闭；吡虫啉农药包被:以不同浓度的吡虫啉农药包被PCR管，4℃过夜，洗涤PCR管，干燥待用；生物素标记DNA；吡虫啉农药单克隆抗体+亲和素+生物素标记DNA的偶联；定量PCR检测；数据处理与分析。相对于现有技术,本方法检出限目前可以达到0.08 mg/kg，是市场在售试剂盒检测方法中检出限最低的方法之一。与同类型产品比较在成本上具有较大优势。具有快速、准确、高效等特点，拥有较大的市场开发潜力。采用本方法原理不仅可以解决农药吡虫啉的快速检测问题，还可以推广应用到其他多种农药的快速检测技术研发上。 | ||
| 搜索关键词： | 吡虫啉 抗体 农药 生物素标记DNA 农药残留 检出限 农药包 痕量 介导 数据处理与分析 快速检测技术 快速检测问题 市场开发潜力 定量PCR检测 单克隆抗体 试剂盒检测 壁处理 亲和素 检测 管壁 光敏 偶联 研发 洗涤 封闭 | ||
【主权项】：
1.一种抗体介导的痕量吡虫啉农药残留的PCR管式检测方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）光敏PCR管壁处理利用0.8%的戊二醛溶液在37℃条件下处理光敏PCR管3~5 h；（2）农药抗体与管壁结合将1‑10 μg/mL吡虫啉农药抗体加入戊二醛处理后的光敏PCR管，4℃ 孵育过夜；（3）封闭；（4）吡虫啉农药包被以不同浓度的吡虫啉农药包被PCR管，4℃过夜，洗涤PCR管，干燥待用；（5）生物素标记DNA；（6）吡虫啉农药单克隆抗体+亲和素+生物素标记DNA的偶联；（7）定量PCR检测；（8）数据处理与分析。
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