[发明专利]强化自噬脐带间充质干细胞条件培养基的制备及在血管生成中的应用有效
申请号: | 201811543842.6 | 申请日: | 2018-12-17 |
公开(公告)号: | CN109517791B | 公开(公告)日: | 2022-04-29 |
发明(设计)人: | 王现伟;王文亚;李晓;张帆;殷国田;张芬熙;崔朝初 | 申请(专利权)人: | 新乡医学院 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;A61K35/51;A61K35/28;A61P9/00 |
代理公司: | 新乡市平原智汇知识产权代理事务所(普通合伙) 41139 | 代理人: | 路宽 |
地址: | 453003 河南省新*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明公开了一种强化自噬的脐带间充质干细胞(UCMSCs)条件培养基的制备及应用,属于间充质干细胞应用技术领域。本发明利用雷帕霉素诱导UCMSCs自噬,而后制备强化自噬的UCMSCs条件培养基,并通过脐静脉内皮细胞成管实验筛选促血管生成效果最好的条件培养基,通过体内外实验比较强化自噬的UCMSCs条件培养基与未诱导自噬的UCMSCs条件培养基的促血管生成效应。实验结果表明:与对照组相比,各组条件培养基均具有促血管生成效应,其中以100nM雷帕霉素强化自噬的UCMSCs条件培养基促血管生成效应最为明显,其效果明显优于未诱导自噬UCMSCs条件培养基。本发明的制备工艺过程简单且成本低廉,实验结果表明制得的强化自噬的UCMSCs条件培养基可有效促进体内外新生血管的生成。 | ||
搜索关键词: | 强化 脐带 间充质 干细胞 条件 培养基 制备 血管 生成 中的 应用 | ||
【主权项】:
1.强化自噬的人脐带间充质干细胞条件培养基的制备方法,其特征在于具体步骤为:将UCMSCs接种于培养瓶中,待其汇合至70%时,用含有不同浓度雷帕霉素的细胞培养基在37℃、体积分数5% CO2饱和湿度的培养箱中孵育6小时;弃去上清,PBS缓冲液漂洗3次,然后加入DMEM完全培养基在37℃、体积分数5% CO2饱和湿度的培养箱中孵育24小时,收集上清,‑80℃冰箱待用,其中DMEM完全培养基的组成为10wt% FBS、100U/mL青霉素和100 U /mL链霉素。
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