[发明专利]猪皮下脂肪前体细胞永生化细胞系的构建方法及用途有效
| 申请号： | 201811548566.2 | 申请日： | 2018-12-18 |
| 公开（公告）号： | CN109628404B | 公开（公告）日： | 2020-04-28 |
| 发明（设计）人： | 单体中;刘嘉琪;有文静;徐子叶;农秋雲;汪以真 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/54;C12N15/85;C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人： | 金祺 |
| 地址： | 310058 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种猪皮下脂肪前体细胞永生化细胞系的构建方法，包括以下步骤：获得原代猪皮下脂肪细胞；培养细胞，待细胞生长至密度为60％～70％时，转染pBABE‑puro‑hTERT质粒；转染48±2h后用含4μg/mL嘌呤霉素的30％血清的DMEM培养基筛选；筛选48±2h后换液为DMEM培养基进行培养；待细胞形成细胞克隆时，将所得的细胞克隆消化下进行培养，直至鉴定获得永生化猪皮下脂肪前体细胞模型。猪皮下脂肪前体细胞永生化细胞系的用途是：用于脂肪前体细胞增殖，或者分化聚酯机制、调控机理的研究。 | ||
| 搜索关键词： | 猪皮 脂肪 体细胞 永生 细胞系 构建 方法 用途 | ||
【主权项】：
1.猪皮下脂肪前体细胞永生化细胞系的构建方法，其特征是包括以下步骤：1)、获得原代猪皮下脂肪细胞；2)、培养细胞，待细胞生长至密度为60％～70％时，转染pBABE‑puro‑hTERT质粒；3)、转染48±2h后用含4μg/mL嘌呤霉素的30％血清的DMEM培养基筛选；4)、筛选48±2h后换液为DMEM培养基进行培养；5)、待细胞形成细胞克隆时，将所得的细胞克隆消化下进行培养，直至鉴定获得永生化猪皮下脂肪前体细胞模型。
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