[发明专利]一种鼠伤寒沙门氏菌外膜囊泡的提取方法有效
申请号: | 201811548607.8 | 申请日: | 2018-12-18 |
公开(公告)号: | CN109554311B | 公开(公告)日: | 2022-01-14 |
发明(设计)人: | 敬文宪;刘永生;李学瑞;周建华;马丽娜 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/21;C12R1/42 |
代理公司: | 北京兴智翔达知识产权代理有限公司 11768 | 代理人: | 郭卫芹 |
地址: | 730046 甘肃*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | 本发明提供一种鼠伤寒沙门氏菌外膜囊泡的提取方法,包括下述步骤:(1)将沙门氏菌菌液,进行10,000×g,4℃,15min离心;(2)回收上清,不要将菌液沉淀倒出,进行13,000×g,4℃,15min离心;(3)回收上清,用PVDF膜滤器进行过滤2次;(4)将过滤的上清进行40,000×g,4℃,2h;弃去上清。本发明应用的高速离心的方案,用40,000×g的离心力成功的对鼠伤寒沙门氏菌的OMVs进行了提取。本发明还解决了鞭毛在OMVs提取物种大量存在的问题,本发明通过应用基因靶向编辑技术对鼠伤寒沙门氏菌的鞭毛基因进行敲除,从而获得高纯度的OMVs。 | ||
搜索关键词: | 一种 伤寒 沙门氏菌 外膜囊泡 提取 方法 | ||
【主权项】:
1.一种鼠伤寒沙门氏菌外膜囊泡的提取方法,其特征在于:包括下述步骤:(1)将沙门氏菌菌液,进行10,000×g,4℃,15min离心;(2)回收上清,不要将菌液沉淀倒出,进行13,000×g,4℃,15min离心;(3)回收上清,用PVDF膜滤器进行过滤2次;(4)将过滤的上清进行40,000×g,4℃,2h;弃去上清。
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