[发明专利]一种检测农残的酶生物传感器及其制备方法与应用

摘要

本发明涉及生物传感技术领域、农残检测领域，具体公开了一种检测农残的酶生物传感器及其制备方法与其在快速检测有机磷农药残留中的应用。利用酶抑制原理，在即用即抛型丝网印刷电极表面依次修饰石墨烯复合材料和植物酯酶构建酶生物传感器，选用差分脉冲伏安法，构建标准曲线，实现对有机磷农药残留的简单、快速、高灵敏检测。本发明采用即用即抛型丝网印刷电极无需人工打磨、操作简单，提高了检测的重现性；将比表面积大、导电性良好的石墨烯纳米复合材料用来修饰电极不仅能够增加酶的固定量，还可以促进传感器工作过程中电子的转移，从而显著提高检测限和灵敏度；采用来源广泛、价格低廉的植物酯酶，能够降低检测成本。

主权项

1.一种纳米金二硫化钨石墨烯复合材料，其特征在于，制备方法如下：1）将0.01~1g氧化石墨烯粉末GO加入40mL甲醇中，超声分散1小时，得到分散均匀的氧化石墨烯的甲醇溶液，再依次将0.5~4.0g的钨酸钠粉末和0.2~2g 硫脲缓慢加入所述氧化石墨烯的甲醇溶液中，超声30分钟使溶液混匀，得到混合液；将所述混合液转移到100mL高压反应釜中，180℃反应24~96小时；反应结束后，将反应釜自然冷却，对所得溶液进行过滤，得到黑色产物；用二次蒸馏水对产物洗涤3次，将产物在60°C氮气保护条件下进行干燥，得到WS2修饰的石墨烯WS2‑GR；2）将20mL 0.1%~0.5%HAuCl4溶液和0.5~1g溴代十六烷基吡啶依次加入50mL离心管中，超声使其混合均匀，再向该离心管中加入5mL新配置的0.1~0.5 g mL‑1抗坏血酸，超声使溶液混合均匀，在50℃水浴条件下加热3~6小时，溶液最终变为紫红色；反应结束后，对所得溶液进行离心，离心速度为2000~8000 r min‑1，离心时间为8min；除去上层清液，用乙醇对产物洗涤3次后，再用二次蒸馏水对产物洗涤3次；最后，将所得产物分散到2~6mL二次蒸馏水中，得到纳米金微球AuNPS的分散液；3）取1~5mg 步骤1）制备的WS2‑GR粉末加入2~6mL步骤2）制备的AuNPS分散液中，超声混合均匀，置于35℃水浴中15~25小时进行自组装；反应结束后，将得到的溶液进行离心，除去上层清液，用二次蒸馏水洗涤产物3次，将所得产物在60°C氮气保护条件下进行干燥，得到纳米金二硫化钨石墨烯复合材料AuNPS/WS2‑GR。