[发明专利]利用树鼩骨髓间充干细胞建立HCV细胞模型的方法有效
申请号: | 201811555412.6 | 申请日: | 2018-12-18 |
公开(公告)号: | CN109680000B | 公开(公告)日: | 2022-07-19 |
发明(设计)人: | 陆彩霞;代解杰;孙晓梅;匡德宣;王文广;仝品芬;李娜;李明学 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院医学生物学研究所 |
主分类号: | C12N15/867 | 分类号: | C12N15/867;C12N5/10;C12Q1/02 |
代理公司: | 昆明正原专利商标代理有限公司 53100 | 代理人: | 于洪;陈左 |
地址: | 650118 云*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | 本发明涉及一种利用树鼩骨髓间充干细胞建立HCV细胞模型的方法,属于生物医药技术领域。该方法先采用OCLN慢病毒载体对树鼩骨髓间充干细胞进行感染,然后,加入CD81慢病毒载体继续进行感染,接着,再加入miR‑122慢病毒载体进行感染,感染4h之后,再加入体积是当前培养基体积1/2的含4μg/mL polybrene的新鲜培养基,第二天,去除旧的培养基,换上新鲜培养基继续培养,得到HCV细胞模型,该细胞具有骨髓间充质干细胞的基本特性和分化潜能,并对HCV易感,支持HCV入胞、复制和产出具有感染性的病毒颗粒,为研究HCV的致病机制及药物筛选提供了新的细胞模型资源。 | ||
搜索关键词: | 利用 骨髓 干细胞 建立 hcv 细胞 模型 方法 | ||
【主权项】:
1.利用树鼩骨髓间充干细胞建立HCV细胞模型的方法,其特征在于,包括如下步骤:先采用OCLN慢病毒载体对树鼩骨髓间充干细胞进行感染,然后,加入CD81慢病毒载体继续进行感染,接着,再加入miR‑122慢病毒载体进行感染,感染4h之后,再加入体积是当前培养基体积1/2的含2‑6μg/mL polybrene的新鲜培养基,第二天,去除旧的培养基,换上新鲜培养基继续培养,得到OCLN/CD81/miR‑122‑BM‑MSCs;之后,将HCVcc病毒接种于OCLN/CD81/miR‑122‑BM‑MSCs中,得到HCV细胞模型;所述的新鲜培养基为DMEM/F12培养基+10%FBS+100U/mL青霉素和100μg/mL链霉素。
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