[发明专利]一种人脂肪干细胞与脐带间充质干细胞成软骨能力的比较方法在审
| 申请号： | 201811560030.2 | 申请日： | 2018-12-20 |
| 公开（公告）号： | CN109679899A | 公开（公告）日： | 2019-04-26 |
| 发明（设计）人： | 朱学义;徐峰波;李雯雯;王秋文;程志远;王彦 | 申请（专利权）人： | 河南省银丰生物工程技术有限公司;银丰生物工程集团有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/077 | 分类号： | C12N5/077;C12N5/0775;C12Q1/02;G01N33/68;C12Q1/6888 |
| 代理公司： | 北京华仲龙腾专利代理事务所(普通合伙) 11548 | 代理人： | 官玉梅 |
| 地址： | 450000 河南省郑*** | 国省代码： | 河南;41 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种人脂肪干细胞与脐带间充质干细胞成软骨能力的比较方法，包括脂肪干细胞分离与培养、脐带间充质干细胞分离与培养、脂肪干细胞成软骨诱导、脐带间充质干细胞成软骨诱导、脂肪干细胞与脐带间充质干细胞的检测和压力调控进行比对。本发明的有益效果是：分别对脂肪干细胞与脐带间充质干细胞建立完善的体外培养系统以及冻存方法，确保分离的脂肪干细胞与脐带间充质干细胞能在体外维持高活力，对脂肪干细胞与脐带间充质干细胞的细胞形态、生长增殖及成软骨能力进行检测，能够揭示二者骨分化能力的不同，均采用胶原酶消化法对脂肪干细胞与脐带间充质干细胞的组织中进行分离，能够分离出高活性、高纯度的脂肪干细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 脂肪干细胞 脐带间充质干细胞 软骨 软骨诱导 体外培养系统 胶原酶消化 分化能力 生长增殖 体外维持 细胞形态 压力调控 高纯度 高活性 检测 比对 冻存 | ||
【主权项】：
1.一种人脂肪干细胞与脐带间充质干细胞成软骨能力的比较方法，其特征在于：包括以下步骤步骤A：脂肪干细胞分离与培养，从组织中分离出脂肪干细胞，经贴壁筛选法纯化细胞、并采用无血清培养基进行体外培养扩增；步骤B：脐带间充质干细胞分离与培养，从组织中分离出脐带间充质干细胞，经贴壁筛选法纯化细胞、并采用无血清培养基进行体外培养扩增；步骤C：脂肪干细胞成软骨诱导，将培养后的脂肪干细胞以细胞浓度5×105细胞/ml种于24孔板中，贴壁后24小时后用骨诱导液进行诱导，每3天换液一次，共诱导2周；步骤D：脐带间充质干细胞成软骨诱导，将培养后的脐带间充质干细胞以细胞浓度5×105细胞/ml种于24孔板中，贴壁后24小时后用骨诱导液进行诱导，每3天换液一次，共诱导2周；步骤E：脂肪干细胞与脐带间充质干细胞的检测，利用甲苯胺蓝染色检测脂肪干细胞和脐带间充质干细胞成软骨诱导后胞中糖胺聚糖的表达；利用免疫细胞化学染色鉴定脂肪干细胞和脐带间充质干细胞成软骨诱导后细胞中Ⅱ型胶原的表达；步骤F：压力调控进行比对，通过压力调控，对人脂肪干细胞与脐带间充质干细胞的细胞增殖基因以及各成软骨相关基因的表达水平进行比较，进而实现人脂肪干细胞与脐带间充质干细胞成软骨能力的比较。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于河南省银丰生物工程技术有限公司;银丰生物工程集团有限公司，未经河南省银丰生物工程技术有限公司;银丰生物工程集团有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201811560030.2/，转载请声明来源钻瓜专利网。
