[发明专利]偶联有链霉亲和素的磁小体及生物分离、免疫检测方法在审
申请号: | 201811567717.9 | 申请日: | 2018-12-21 |
公开(公告)号: | CN109283326A | 公开(公告)日: | 2019-01-29 |
发明(设计)人: | 邓泽平;罗容;许慧;陈瑶;陈选;张安林;刘赛文 | 申请(专利权)人: | 湖南华腾制药有限公司 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53;G01N33/543;G01N33/569 |
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地址: | 410205 湖南*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明公开了偶联有链霉亲和素的磁小体及生物分离、免疫检测方法,其中链霉亲和素通过化学共价键交联在所述磁小体表面,且所述磁小体表面带有氨基、羧基、巯基、或羟基功能基团。所述磁小体的制备工序包括了磁小体的提取和偶联链霉亲和素2个步骤。本发明的偶联有链霉亲和素的磁小体具有交联效果好、生物相容性高、磁控性强、超顺磁性和较低毒性的优势。 | ||
搜索关键词: | 磁小体 链霉亲和素 偶联 免疫检测 生物分离 表面带有氨基 羟基功能基团 化学共价键 生物相容性 超顺磁性 交联效果 低毒性 磁控 制备 巯基 羧基 | ||
【主权项】:
1.一种偶联有链霉亲和素的磁小体,其特征在于,链霉亲和素通过化学共价键交联在所述磁小体表面,且所述磁小体表面带有氨基、羧基、巯基或羟基功能基团,其通过包含以下工序的方法制造:1)磁小体的提取将趋磁细菌的发酵液以3000 r/min的转速离心25min后收集菌体,菌体以1:8的质量体积比悬浮于HEPES缓冲液中,高压均质后分离,收集磁小体;2)偶联链霉亲和素取1mg磁小体于离心管中,加入HEPES缓冲液,保证磁小体的终浓度为0.8mg/mL,以3000 r/min的转速离心后,加入13μL的NHS‑Biotin和10mmol/L的PBS缓冲液,使终体积为0.5mL,33℃下温育28min后离心收集Biotin‑磁小体;向Biotin‑磁小体中按1:6的摩尔比添加链霉亲和素,25℃的温度下温育3h后离心、分离收集偶联有链霉亲和素的磁小体。
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