[发明专利]一种快速诱导埃塞俄比亚油菜毛状根的方法在审
| 申请号： | 201811585408.4 | 申请日： | 2018-12-24 |
| 公开（公告）号： | CN109576302A | 公开（公告）日： | 2019-04-05 |
| 发明（设计）人： | 徐秉良;李世娟;程成;李隆;刘蓓;岳东晓;姚军胜 | 申请（专利权）人： | 甘肃农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H5/06;A01H6/20 |
| 代理公司： | 张家界市慧诚商标专利事务所 43209 | 代理人： | 高红旺 |
| 地址： | 730070 *** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 一种快速诱导埃塞俄比亚油菜毛状根的方法,包括步骤：(1)将无菌的油菜外植体用野生型和含有GUS基因的农杆菌K599侵染；(2)侵染后的外植体放入无抗MS固体培养基上黑暗条件下进行共培养；(3)共培养后的外植体移至诱导培养基中培养；(4)将诱导产生的油菜毛状根进行继代和扩增培养。(5)对含有GUS基因的毛状根进行GUS染色探究转化效率。本发明对影响埃塞俄比亚油菜毛状根诱导外植体预培养、侵染、共培养的时间和侵染液浓度进行探究，以及对转基因的毛状根进行GUS染色鉴定,通过鉴定颜色探究转化效率，实现了油菜毛状根快速的诱导。本发明方法适用于多种油菜品种毛状根的诱导,取材方便、适用性强、诱导速度快。 | ||
| 搜索关键词： | 毛状根 诱导 油菜 侵染 转化效率 外植体 外植体预培养 毛状根诱导 诱导培养基 黑暗条件 扩增培养 油菜品种 农杆菌 野生型 转基因 放入 继代 染液 无菌 取材 | ||
【主权项】：
1.一种快速诱导埃塞俄比亚油菜毛状根的方法,其特征是：将2‑3周龄的埃塞俄比亚油菜无菌苗，分别用侵染液A和侵染液B侵染5‑10分钟，然后进行共培养,24‑48小时后，转移到筛选培养基中进行培养，一周以后从外植体中剪下生长快速的毛状根，转移到继代培养基上，二周以后转移到液体培养基中进行扩大培养，一个月以后得到大量毛状根；所述的侵染液A为野生型发根农杆菌K599，侵染液B为转入GUS报告基因的发根农杆菌K599。
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