[发明专利]一种工程菌株的构建方法在审
| 申请号： | 201811588976.X | 申请日： | 2018-12-24 |
| 公开（公告）号： | CN109652353A | 公开（公告）日： | 2019-04-19 |
| 发明（设计）人： | 米铁柱;张国栋;刘佳音;邹丹丹;徐春莹;修旺珊;孙艳君 | 申请（专利权）人： | 青岛袁策集团有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/29;C12N15/74;C12N15/66;C12N15/65;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京华仁联合知识产权代理有限公司 11588 | 代理人： | 李冰 |
| 地址： | 266000 山东省青岛市李*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本申请公开了一种工程菌株的构建方法，包括以下步骤：A、用提取待转化植物的DNA；B、分别获得DsRed基因、EAT1基因、ZmAA基因三种连锁基因表达盒；C、去除Hpt基因的pCAMBIA1300质粒的获取；D、各个表达盒的连接；E、融合片段与pCAMBIA1300‑hpt‑质粒的连接。F、导入到农杆菌中，形成能够用于介导转化植物细胞的工程菌农杆菌。本发明工程菌株的构建方法，构建了双T‑DNA载体，其中一个T‑DNA区含有上述的三连锁基因，另一个T‑DNA区含有潮霉素或者卡那霉素等抗性基因，用于愈伤转化及植株再生阶段的筛选。 | ||
| 搜索关键词： | 构建 工程菌株 连锁基因 表达盒 农杆菌 质粒 基因 转化植物细胞 卡那霉素 抗性基因 植株再生 转化植物 潮霉素 工程菌 介导 愈伤 去除 筛选 融合 申请 转化 | ||
【主权项】：
1.一种工程菌株的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：A、用提取待转化植物的DNA；B、分别获得DsRed基因、EAT1基因、ZmAA基因三种连锁基因表达盒；C、去除Hpt基因的pCAMBIA1300质粒的获取；D、各个表达盒的连接；E、融合片段与pCAMBIA1300‑hpt‑质粒的连接。F、导入到农杆菌中，形成能够用于介导转化植物细胞的工程菌农杆菌。
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