[发明专利]一种利用大肠杆菌表达猪圆环病毒3型ORF2蛋白的方法及其应用在审
| 申请号： | 201811603592.0 | 申请日： | 2018-12-26 |
| 公开（公告）号： | CN109609534A | 公开（公告）日： | 2019-04-12 |
| 发明（设计）人： | 李少辉;陶家权;单玉飞;张开岳;陶慧丽 | 申请（专利权）人： | 镇江瑞华生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/62;C12N1/21;C12P21/06;C07K14/01;C07K1/22;A61K39/12;A61P31/20;C12R1/19 |
| 代理公司： | 镇江基德专利代理事务所(普通合伙) 32306 | 代理人： | 邓月芳 |
| 地址： | 212000 江苏省镇江市新区*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种利用大肠杆菌表达猪圆环病毒3型ORF2蛋白的方法及其应用，1)分别克隆促溶标签GST基因、促溶标签His6‑SUMO基因和PVC3‑ORF2基因；2)将获得的3种基因连接，获得融合基因；3)将获得的融合基因与大肠杆菌表达载体连接，得到含融合基因的重组表达载体；4)将获得重组表达载体转化入大肠杆菌表达菌株感受态细胞中，获得包含融合基因的重组大肠杆菌表达菌株；5)将获得的重组表达菌株进行培养，利用IPTG诱导融合蛋白表达；6)将培养获得的重组表达菌体回收、破碎并分离纯化得猪圆环病毒3型ORF2蛋白；不但获得表达量较高的可溶性蛋白，且达到了较高的免疫还原性。 | ||
| 搜索关键词： | 融合基因 大肠杆菌表达 猪圆环病毒 重组表达载体 标签 大肠杆菌表达菌株 重组表达菌株 重组大肠杆菌 感受态细胞 可溶性蛋白 表达菌株 分离纯化 基因连接 菌体回收 融合蛋白 载体连接 重组表达 表达量 还原性 破碎 应用 克隆 转化 | ||
【主权项】：
1.一种利用大肠杆菌表达猪圆环病毒3型ORF2蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)分别克隆促溶标签GST基因、促溶标签His6‑SUMO基因和PVC3‑ORF2基因，其中，所述的PVC3‑ORF2基因包含序列表中SEQ ID NO:2序列；2)将步骤1)获得的3种基因连接，获得融合基因GST‑His6‑SUMO‑PVC3‑ORF2，该融合基因包含序列表中SEQ ID NO:3序列；3)将步骤2)获得的融合基因与大肠杆菌表达载体连接，得到含融合基因的重组表达载体；4)将步骤3)获得重组表达载体转化入大肠杆菌表达菌株感受态细胞中，获得包含融合基因的重组大肠杆菌表达菌株；5)将步骤4)获得的重组表达菌株进行培养，利用IPTG诱导融合蛋白表达；6)将步骤5)培养获得的重组表达菌体破碎并分离纯化得猪圆环病毒3型ORF2蛋白。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于镇江瑞华生物科技有限公司，未经镇江瑞华生物科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201811603592.0/，转载请声明来源钻瓜专利网。
