[发明专利]一种基于高通量测序检测小鼠DNA TCR beta链免疫组库的方法及其专用引物组

摘要

本发明公开了一种基于高通量测序检测小鼠DNA TCR beta链免疫组库的方法及其专用引物组。所述引物组由序列表的序列1‑序列24所示的24条引物组成。本发明还保护一种构建小鼠DNA TCRβ链免疫组库的DNA文库的方法，包括如下步骤：(1)以小鼠的基因组DNA为模板，采用所述引物组进行PCR扩增，回收扩增产物；(2)以扩增产物为模板，采用测序平台的正向通用引物和测序平台的反向通用引物进行PCR扩增，回收扩增产物，即为小鼠DNA TCRβ链免疫组库的DNA文库。采用本发明提供的引物组或方法获得TCRβ链免疫组库，具有灵敏度高、特异性高、可重复性高、实验成本低的优势。

主权项

1.引物组，由20条正向引物和4条反向引物组成；所述20条正向引物由正向引物1‑20组成；所述4条反向引物由反向引物1‑4组成；所述正向引物1为如下(a1)或(a2)：(a1)序列表的序列1所示的单链DNA分子；(a2)将序列1经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列1具有相同功能的DNA分子；所述正向引物2为如下(b1)或(b2)：(b1)序列表的序列2所示的单链DNA分子；(b2)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的DNA分子；所述正向引物3为如下(c1)或(c2)：(c1)序列表的序列3所示的单链DNA分子；(c2)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同功能的DNA分子；所述正向引物4为如下(d1)或(d2)：(d1)序列表的序列4所示的单链DNA分子；(d2)将序列4经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列4具有相同功能的DNA分子；所述正向引物5为如下(e1)或(e2)：(e1)序列表的序列5所示的单链DNA分子；(e2)将序列5经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列5具有相同功能的DNA分子；所述正向引物6为如下(f1)或(f2)：(f1)序列表的序列6所示的单链DNA分子；(f2)将序列6经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列6具有相同功能的DNA分子；所述正向引物7为如下(g1)或(g2)：(g1)序列表的序列7所示的单链DNA分子；(g2)将序列7经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列7具有相同功能的DNA分子；所述正向引物8为如下(h1)或(h2)：(h1)序列表的序列8所示的单链DNA分子；(h2)将序列8经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列8具有相同功能的DNA分子；所述正向引物9为如下(i1)或(i2)：(i1)序列表的序列9所示的单链DNA分子；(i2)将序列9经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列9具有相同功能的DNA分子；所述正向引物10为如下(j1)或(j2)：(j1)序列表的序列10所示的单链DNA分子；(j2)将序列10经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列10具有相同功能的DNA分子；所述正向引物11为如下(k1)或(k2)：(k1)序列表的序列11所示的单链DNA分子；(k2)将序列11经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列11具有相同功能的DNA分子；所述正向引物12为如下(l1)或(l2)：(l1)序列表的序列12所示的单链DNA分子；(l2)将序列12经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列12具有相同功能的DNA分子；所述正向引物13为如下(m1)或(m2)：(m1)序列表的序列13所示的单链DNA分子；(m2)将序列13经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列13具有相同功能的DNA分子；所述正向引物14为如下(n1)或(n2)：(n1)序列表的序列14所示的单链DNA分子；(n2)将序列14经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列14具有相同功能的DNA分子；所述正向引物15为如下(o1)或(o2)：(o1)序列表的序列15所示的单链DNA分子；(o2)将序列15经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列15具有相同功能的DNA分子；所述正向引物16为如下(p1)或(p2)：(p1)序列表的序列16所示的单链DNA分子；(p2)将序列16经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列16具有相同功能的DNA分子；所述正向引物17为如下(q1)或(q2)：(q1)序列表的序列17所示的单链DNA分子；(q2)将序列17经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列17具有相同功能的DNA分子；所述正向引物18为如下(r1)或(r2)：(r1)序列表的序列18所示的单链DNA分子；(r2)将序列18经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列18具有相同功能的DNA分子；所述正向引物19为如下(s1)或(s2)：(s1)序列表的序列19所示的单链DNA分子；(s2)将序列19经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列19第25‑48位具有相同功能的DNA分子；所述正向引物20为如下(t1)或(t2)：(t1)序列表的序列20所示的单链DNA分子；(t2)将序列20经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列20具有相同功能的DNA分子；所述反向引物1为如下(u1)或(u2)：(u1)序列表的序列21所示的单链DNA分子；(u2)将序列21经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列21具有相同功能的DNA分子；所述反向引物2为如下(v1)或(v2)：(v1)序列表的序列22所示的单链DNA分子；(v2)将序列22经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列22具有相同功能的DNA分子；所述反向引物3为如下(w1)或(w2)：(w1)序列表的序列23所示的单链DNA分子；(w2)将序列23经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列23具有相同功能的DNA分子；所述反向引物4为如下(x1)或(x2)：(x1)序列表的序列24所示的单链DNA分子；(x2)将序列24经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列24具有相同功能的DNA分子。