[发明专利]一种芽孢杆菌属固体微生物菌剂的制备及应用

摘要

本发明公开了一种芽孢杆菌属固体微生物菌剂，制备方法，它包括以下步骤：步骤一，功能微生物的培养；步骤二，功能微生物的发酵；步骤三，菌株孢子液的制备；步骤四，微生物菌剂制备。应用在具有防病、促生长功能的固体微生物肥料中和应用在具有耐高温、耐纤维素、高效降解能力的固体有机物料腐熟剂中。具有促进植物生长，活化土壤磷、钾养分的功能，成本低、运输方便、贮存方便，可有效降低化肥、农药施用量。

主权项

1.一种芽孢杆菌属固体微生物菌剂的制备方法，其特征在于：它包括以下步骤：步骤一，功能微生物的培养，芽孢杆菌培养基配方按重量份数如下：黄豆粉10‑16份、蔗糖7‑13份、蛋白胨1‑5份、玉米粉2‑8份、碳酸钙3‑9份、鱼粉3‑7份、氯化钙0.2‑0.8份、磷酸二氢钾0.2‑0.7份、磷酸氢二钾0.2‑0.8份、硫酸锰0.1‑0.5份、氢氧化钠0.1‑0.5份、氯化钠2‑7份、消泡剂1‑2份，接种量(体积百分比)为0.5％‑1.5％，在35‑39℃的好氧条件下,培养1‑3天；所述消泡剂为有机硅消泡剂；步骤二，功能微生物的发酵，发酵包括灭菌、接种、发酵；所述灭菌的过程中，先对发酵罐进行空消，然后加入培养基后进行实消，空消条件为：压力0.15MPa，温度123℃，时间1h；实消条件为：压力0.15MPa，温度123℃，时间35min；所述接种的过程为：待灭菌完成，培养液温度下降至37℃时，进行取样，利用划线培养和显微镜镜检，无活菌生长，灭菌完成，然后开始接种，接种比例(体积比)为菌种/培养液1:120；所述接种开始8h后，进行取样，利用划线培养和显微镜镜检，检测发酵有无污染；所述发酵过程需要控制转速、通气量、发酵温度、发酵时间；所述转速在发酵前6h为80r/min,此后每隔2h转速升高10r，达到120r/min后保持该转速至发酵结束；所述通气量为：种子罐发酵前8h保持通风量10m³/h,后每隔1h增加通风量1m³/h，至通风量达到15m³/h时保持发酵至结束，整个过程保持罐压在0.06Mpa；发酵罐前8h保持通风量30m³/h,后每隔1h增加通风量5m³/h，至通风量达到50m³/h时保持发酵至结束，整个过程保持罐压在0.06Mpa；所述发酵进行24h后，进行取样，利用划线培养和显微镜镜检，检测发酵是否污染和芽孢率，此后每6h进行一次取样检测，直到芽孢率达到95％以上，完成发酵；所述发酵完成后，采用稀释涂板法取样检测发酵液菌量，菌量大于2.0×10⁹cfu/ml即可；所述发酵温度为36.5℃—37.5℃；步骤三，菌株孢子液的制备，将步骤二中发酵检测合格的发酵液采用高速蝶式离心机离心，转速为7000r/min，收集离心沉淀液，并检测其芽孢量，芽孢量≥2.0×10¹⁰cfu/ml时，取离心沉淀液备用；步骤四，微生物菌剂制备，取步骤三中离心沉淀液并添加吸附载体，离心沉淀液与吸附载体的质量比为1:3，混合均匀，通过塔形连续式真空干燥设备干燥后，干燥温度为30‑45℃，含水率(质量百分比)为10％‑20％，冷却包装即得。