[发明专利]一种耐盐碱的异养硝化-厌氧反硝化菌株的筛选方法在审
| 申请号： | 201811622866.0 | 申请日： | 2018-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN109593838A | 公开（公告）日： | 2019-04-09 |
| 发明（设计）人： | 魏巍;杨赛;朱琳;俞冰倩;高凤 | 申请（专利权）人： | 江苏大学 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 212013 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明属于环境微生物技术领域，具体涉及一种耐盐碱的异养硝化‑厌氧反硝化菌株的筛选方法。本发明所述方法通过PCR初步筛选提取目标土壤微生物的总DNA，配置培养基，高盐碱环境中异养硝化菌株的分离、纯化与筛选，厌氧反硝化菌株的分子生物学初步鉴定以及高盐碱环境中对异养硝化与厌氧反硝化菌株的能力进行验证获得耐盐碱的异养硝化与厌氧反硝化细菌，建立一种快捷、准确、高效获得目的菌株的方法。根据本发明所提供的方法可以成功筛选得到耐盐碱的异养硝化与厌氧反硝化细菌，并且筛选到的细菌能够有效去除高盐碱水体中的氮素，在实际应用中具有较好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 硝化 厌氧 异养 反硝化菌 耐盐碱 筛选 高盐碱 反硝化细菌 菌株 分子生物学 环境微生物 初步筛选 目标土壤 培养基 总DNA 氮素 去除 微生物 应用 水体 细菌 验证 配置 成功 | ||
【主权项】：
1.一种耐盐碱的异养硝化‑厌氧反硝化菌株的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)样品筛选：提取目标土壤微生物的总DNA，PCR初步筛选含有耐盐碱的异养硝化‑厌氧反硝化菌株的微生物土样；(2)在高盐碱环境中将步骤（1）中筛选出的土样在分离纯化培养基中进行异养硝化菌株的分离、纯化与筛选，获得异养硝化菌株；(3) 将获得的异养硝化菌株进行PCR扩增以及电泳检测，将目的条带在460‑510 bp的PCR产物对应的菌株认定为同时具有异养硝化与反硝化功能的菌株；(4)高盐碱环境中，将步骤（3）中得到的同时具有异养硝化与厌氧反硝化功能的菌株制备成种子液，验证其异养硝化能力和厌氧反硝化能力。
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