[发明专利]一种同时检测YFV、RVFV、WNV和DENV四种病毒的引物及其检测方法

摘要

本发明公开了一种同时检测YFV、RVFV、WNV和DENV四种病毒的引物及其检测方法。方法包括以下步骤：(1)设计引物，引物序列如SEQ ID NO.1～10；(2)制备与特异性引物相对应的病毒靶基因；(3)反转录制备cDNA；(4)GeXP多重PCR检测。本发明引物特异性好，灵敏度高，能够同时检测YFV、RVFV、WNV和DENV四种病毒，检测效率高。

主权项

1.一种同时检测YFV、RVFV、WNV和DENV四种病毒的引物，其特征在于，其包括特异性嵌合引物以及通用引物，所述通用引物的上游引物的5’端用荧光染料标记，特异性嵌合引物扩增后的互补链能与经荧光染料标记的通用引物相结合，引物具体序列如下：特异性嵌合引物：YFV‑F:5’‑AGGTGACACTATAGAATAGAAACCGGKATARAAACHACGGAT‑3’；YFV‑R:5’‑GTACGACTCACTATAGGGACCTCTAACCTCTRGACYCCRTCT‑3’；RVFV‑F:5’‑AGGTGACACTATAGAATATACAATGCTRACTCTGGCACTYC‑3’；RVFV‑R:5’‑GTACGACTCACTATAGGGAGCACCTCTYTCATCTCCCCTA‑3’；WNV‑F:5’‑AGGTGACACTATAGAATAAGAGTTGATGTKCGGCTTGA‑3’；WNV‑R:5’‑GTACGACTCACTATAGGGACTCCTTTGGTGAGGGAGTGTC‑3’；DENV‑F:5’‑AGGTGACACTATAGAATAGTTGTTAGTCTRYGTGGACCGAC‑3’；DENV‑R:5’‑GTACGACTCACTATAGGGAYCARHAYYCCTGCTGTTGGSG‑3’；通用引物‑F:5’‑AGGTGACACTATAGAATA‑3’；通用引物‑R:5’‑GTACGACTCACTATAGGGA‑3’。