[发明专利]脐血血浆精华液或其冻干粉剂的制备方法

摘要

本发明涉及脐血血浆精华液或其冻干粉剂的制备方法。具体的，一方面涉及制备脐血血浆精华液或其冻干粉剂的方法，该方法包括如下步骤：提取分离脐血血浆，使其用CaCl2溶液激活，孵育，离心，得到脐血血浆精华液，任选地将其冷冻干燥制成冻干粉剂。本发明还提供了一种脐血血浆以及其提取分离的方法。本发明方法及其所得的脐血血浆精华液或其冻干粉剂以及脐血血浆呈现如说明书所述优异技术效果。

主权项

1.制备脐血血浆精华液或其冻干粉剂的方法，该方法包括如下步骤(1)提供于产前当天采集的产妇外周血置于采血管中，提供生产时采集的新鲜脐血置于血袋中，运回实验室待处置；(2)外周血进行病毒检测，以确保脐血样本的安全性；(3)从血袋中抽出脐血样本，将其与生理盐水以1：0.8～1.3体积比稀释，充分混匀；(4)将ficoll分离液加至离心管中，缓慢加入0.6～1.2倍体积的步骤(3)所得脐血稀释液，1500～2500rpm离心10～20min，脐血分成三层；(5)缓慢抽取上层血浆，取适量用于微生物检测，其余任选的置于‑50℃以下例如置于‑80℃冷冻保存，分离得到脐血血浆；另外依次分别缓慢吸出中间层、分离液层和下层，另行处理；(6)取上一步骤所得脐血血浆(任选的预先进行病毒检测和微生物检测，且结果均呈阴性)，必要时37℃水浴解冻至常温；(7)向脐血血浆中添加浓度为20％的CaCl2溶液(CaCl2溶液与脐血血浆的体积比为1：8～12，例如1：10)，37℃摇床培养箱中100rpm振荡孵育30min，4000G离心10分钟，去纤维蛋白沉淀，收集上清；(8)向所得上清中添加浓度为20％的CaCl2溶液(CaCl2溶液与上清的体积比为1：8～12，例如1：10)，37℃摇床培养箱中100rpm振荡孵育24h，4000G离心10分钟，去纤维蛋白沉淀，收集上清，得透明澄清的脐血血浆精华液；任选的使其冷冻干燥制成脐血血浆精华液冻干粉剂。