[发明专利]一种家蚕微孢子虫孢原质的分离富集方法在审
| 申请号： | 201811627351.X | 申请日： | 2018-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN109706080A | 公开（公告）日： | 2019-05-03 |
| 发明（设计）人： | 李田;何强;周泽扬 | 申请（专利权）人： | 西南大学 |
| 主分类号： | C12N1/10 | 分类号： | C12N1/10;C12N1/02;C12R1/90 |
| 代理公司： | 北京同恒源知识产权代理有限公司 11275 | 代理人： | 赵荣之 |
| 地址： | 400715*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种家蚕微孢子虫孢原质的分离富集方法，具体步骤如下：(1)利用0.1M KOH水溶液处理家蚕微孢子虫孢子，离心，弃上清，加入TC100昆虫培养基悬起孢子沉淀，孵育，得到培养基悬起的孢子样品；(2)吸取步骤(1)的孢子样品，进行细胞核染色，观察极管中弹出的孢原质的情况，统计孢子的发芽率；(3)当孢子发芽率达到60％时，将发芽后的孢子样品加入到30％和60％两个密度梯度的percoll溶液中，进行密度梯度离心分离孢原质；(4)收集上层30％密度层的percoll溶液，清洗和离心即可。本发明操作方便，同时可以高效分离并富集孢原质，并对深入研究微孢子虫的侵染机制以及生活史具有深远意义。 | ||
| 搜索关键词： | 原质 家蚕微孢子虫 孢子样品 孢子 分离富集 密度梯度离心 发芽率 昆虫培养基 水溶液处理 细胞核染色 孢子发芽率 高效分离 密度梯度 深远意义 微孢子虫 培养基 密度层 孵育 富集 极管 侵染 沉淀 发芽 清洗 上层 观察 统计 研究 | ||
【主权项】：
1.一种家蚕微孢子虫孢原质的分离富集方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)利用0.1M KOH水溶液处理家蚕微孢子虫孢子，室温孵育30min，离心，弃上清，加入TC100昆虫培养基悬起孢子沉淀，孵育，得到培养基悬起的孢子样品；(2)吸取步骤(1)的孢子样品，进行细胞核染色，观察极管中弹出的孢原质的情况，统计孢子的发芽率；(3)当孢子发芽率达到60％时，将发芽后的孢子样品加入到30％和60％两个密度梯度的percoll溶液中，进行密度梯度离心分离孢原质；(4)收集上层30％密度层的percoll溶液，清洗和离心即可。
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