[发明专利]一种对映选择性提高的宇佐美曲霉环氧化物水解酶突变体有效
申请号: | 201811633720.6 | 申请日: | 2018-12-29 |
公开(公告)号: | CN109609479B | 公开(公告)日: | 2021-07-27 |
发明(设计)人: | 邬敏辰;苏永君;王婷婷;徐雄峰;文正;胡博淳;胡蝶;李剑芳 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/14 | 分类号: | C12N9/14;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12P41/00;C12P7/22 |
代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 张勇 |
地址: | 214000 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种对映选择性提高的宇佐美曲霉环氧化物水解酶突变体,属于酶工程和生物催化技术领域。本发明基于理性设计对宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)环氧化物水解酶(AuEH2)进行分子改造,结合基因的定点饱和突变方法,获得多个对映选择性提高的环氧化物水解酶突变体。本发明获得的9个对映选择性提高的突变体催化外消旋对甲基苯基缩水甘油醚(rac‑pMPGE)的对映体比率(E值)相比野生型,从12.7分别提高至32.4、31.1、27.8、25.8、23.5、22.4、20.2、14.1、13.6。 | ||
搜索关键词: | 一种 选择性 提高 宇佐美 曲霉 环氧化物 水解 突变体 | ||
【主权项】:
1.一种对映选择性提高的环氧化物水解酶AuEH2突变体,其特征在于,所述突变体是(a)或(b):(a)在SEQ ID NO.1所示序列基础上,将第250位丙氨酸(A)突变为组氨酸(H)、精氨酸(R)、甘氨酸(G)、赖氨酸(K)、天冬酰胺(N)、天冬氨酸(D)、谷氨酸(E)、谷氨酰胺(Q)、或脯氨酸(P);(b)在(a)限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或者添加一个或几个氨基酸且具有环氧化物水解酶活性的由(a)衍生的蛋白质。
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