[发明专利]一种提高碱基编辑系统编辑效率的方法在审
| 申请号： | 201811634032.1 | 申请日： | 2018-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN109679989A | 公开（公告）日： | 2019-04-26 |
| 发明（设计）人： | 杨进孝;张成伟;徐雯;袁爽;李璐 | 申请（专利权）人： | 北京市农林科学院 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H5/00;A01H6/46 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 100097 北京市海淀区曙*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种提高碱基编辑系统编辑效率的方法。该方法包括如下步骤：使受体表达sgRNA、抗潮霉素蛋白、Cas9蛋白、胞嘧啶脱氨酶和尿嘧啶DNA糖化酶抑制剂，从而对所述受体基因组中的靶基因进行碱基编辑；受体为植物愈伤组织；导入植物愈伤组织的过程中，使用潮霉素作为筛选剂筛选抗性愈伤组织；潮霉素的浓度为35‑80mg/L。实验证明，提高筛选剂潮霉素的浓度，可以提高SpCas9n(D10A)&PmCDA1&UGI碱基编辑系统和rAPOBEC1&SpCas9n&UGI碱基编辑系统的C→T碱基替换效率，进而获得高效获得突变体。本发明具有重要的应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 碱基 编辑系统 潮霉素 植物愈伤组织 筛选剂 蛋白 胞嘧啶脱氨酶 抗性愈伤组织 受体基因组 受体表达 靶基因 尿嘧啶 糖化酶 突变体 抑制剂 替换 筛选 应用 | ||
【主权项】：
1.一种提高碱基编辑系统编辑效率的方法，包括如下步骤：使受体表达sgRNA、抗潮霉素蛋白、Cas9蛋白和胞嘧啶脱氨酶，从而对所述受体基因组中的靶基因进行碱基编辑。
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