[发明专利]一种山核桃多肽的提取方法在审
申请号: | 201811639785.1 | 申请日: | 2018-12-29 |
公开(公告)号: | CN109609576A | 公开(公告)日: | 2019-04-12 |
发明(设计)人: | 许文灏;王鲁黔;苏为科 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/34;C07K1/14 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;李世玉 |
地址: | 310014 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种山核桃多肽的提取方法,所述方法为:将脱脂山核桃粉,加入固相试剂中混合,在5~30Hz的条件下机械球磨混匀,获得球磨粉末;将球磨粉末加入缓冲溶液充分混合,调节pH值至8~9,加入碱性蛋白酶,在45~55℃的条件下酶解完全后,灭酶,将灭酶后的溶液离心,收集上清液,透析,获得山核桃多肽。本发明采用了机械化学结合酶解技术制备山核桃多肽,与传统酶解比较,脱脂山核桃粉与固相试剂进行共研磨粉碎,植物细胞壁在反复机械应力作用下破裂,有利于蛋白质等大分子的溶出,不仅缩短了酶解时间,改善了酶解效果,而且与普通酶解相比,山核桃多肽得率可以提高64.9%。 | ||
搜索关键词: | 山核桃 多肽 酶解 固相试剂 球磨粉末 脱脂 灭酶 机械应力作用 碱性蛋白酶 植物细胞壁 充分混合 缓冲溶液 机械球磨 酶解技术 酶解效果 溶液离心 共研磨 上清液 得率 混匀 溶出 透析 制备 蛋白质 机械化 破裂 | ||
【主权项】:
1.一种山核桃多肽的提取方法,其特征在于所述方法按如下步骤进行:(1)将山核桃仁干燥、粉粹,再用正己烷在69℃下回流提取,真空抽滤,滤饼干燥,获得脱脂山核桃粉;(2)将步骤(1)得到的脱脂山核桃粉,加入固相试剂中混合,在5~30Hz的条件下机械球磨混匀,获得球磨粉末;所述固相试剂为下列之一:氢氧化钠、柠檬酸、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氢氧化钾、碳酸钙、碳酸钠一种或几种任意比例的混合物;(3)将步骤(2)获得的球磨粉末加入缓冲溶液充分混合,调节pH值至8~9,加入碱性蛋白酶,在45~55℃的条件下酶解完全后,灭酶,将灭酶后的溶液离心,收集上清液,用截留分子量为0.3kDa的透析膜于去离子水中透析,收集截留液,冷冻干燥,获得山核桃多肽。
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