[发明专利]一种饲用γ-氨基丁酸的生产方法在审
申请号: | 201811642477.4 | 申请日: | 2018-12-29 |
公开(公告)号: | CN109504717A | 公开(公告)日: | 2019-03-22 |
发明(设计)人: | 张继学;陆克文 | 申请(专利权)人: | 上海邦成生物工程有限公司 |
主分类号: | C12P13/00 | 分类号: | C12P13/00;C12N9/88;C12R1/19 |
代理公司: | 上海申新律师事务所 31272 | 代理人: | 俞涤炯 |
地址: | 201506 上海市金山区*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种饲用γ‑氨基丁酸的生产方法,包括步骤:(1)采用基因工程大肠杆菌经种子培养基培养的种子液,按照1%~4%接种量接种于发酵培养基;(2)加入4‑8g/L诱导剂进行诱导谷氨酸脱羧酶的表达,当OD600达到10‑18,开始梯度调整发酵液的培养条件,同时不断检测菌体酶活力,当酶活力达到55U以上时,发酵结束;(3)将完成的发酵液通过加热系统,将温度升到30‑38℃,搅拌转速100‑200rpm,加入转化原料;(4)将转化后的发酵液直接进行喷雾干燥,即得。本发明饲用γ‑氨基丁酸的生产方法,通过优化谷氨酸生产菌的生产条件,快速检测和控制谷氨酸脱羧酶活力,提高控制谷氨酸脱羧酶活力的方法,达到提高生产效率和稳定生产的能力。 | ||
搜索关键词: | 谷氨酸脱羧酶 氨基丁酸 发酵液 酶活力 种子培养基培养 谷氨酸生产菌 大肠杆菌 发酵培养基 基因工程 加热系统 搅拌转速 快速检测 培养条件 喷雾干燥 生产条件 生产效率 梯度调整 稳定生产 检测菌 接种量 诱导剂 种子液 生产 转化 发酵 接种 诱导 优化 | ||
【主权项】:
1.一种饲用γ‑氨基丁酸的生产方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)采用基因工程大肠杆菌经种子培养基培养的种子液,按照1%~4%接种量接种于发酵培养基,空气量1:0.4~1.2vvm,温度32‑37℃,搅拌200‑300rpm培养至OD6001.5~2.5降温至25‑28℃;(2)加入4‑8g/L诱导剂进行诱导谷氨酸脱羧酶的表达,当OD600达到10‑18,开始梯度调整发酵液的培养条件,最低降至温度20℃、转速30rpm、风量1:0.1vvm,同时不断检测菌体酶活力,当酶活力达到55U以上时,发酵结束;(3)将完成的发酵液通过加热系统,将温度升到30‑38℃,搅拌转速100‑200rpm,加入转化原料,通过控制添加转化原料的速度,控制发酵液的pH为4.0‑6.5,待反应至转化原料浓度0.6%(w/v)以下时,停止转化反应;(4)将转化后的发酵液直接进行喷雾干燥,即得高含量的饲用γ‑氨基丁酸。
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