[发明专利]人尿液中游离儿茶酚胺及其代谢物的高效液相色谱串联质谱检测方法

摘要

本发明公开了一种人尿液中游离儿茶酚胺及其代谢物的高效液相色谱串联质谱检测方法，包括如下步骤：(1)样品预处理，尿液样品依次加入内标工作液和磷酸溶液，涡旋混合；(2)弱阳离子交换固相萃取96孔板(SPE96孔板)活化；(3)固相萃取处理，步骤(1)处理后样品上样至步骤(2)活化后的SPE 96孔板，甲酸甲醇溶液洗脱，洗脱液用氮气吹干；(4)复溶，高效液相色谱串联质谱法进行分析检测。本发明方法具有高准确度、高重现性、高灵敏度、高专属性、高效率、高通量、低成本、操作简便快速等优点。

主权项

1.人尿液中游离儿茶酚胺及其代谢物的高效液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，包含人尿液中游离去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、多巴胺(DA)、甲氧基去甲肾上腺素(NMN)以及甲氧基肾上腺素(MN)的高效液相色谱串联质谱检测方法，包括以下步骤：(1)样本预处理：取100～500μL人尿液，依次加入10～50μL内标工作液和0.1～1mL磷酸溶液，涡旋混匀；(2)SPE96孔板活化：取弱阳离子交换固相萃取96孔板，依次加入1mL甲醇与水，待其自然流干；(3)固相萃取：将步骤(1)处理后的样品转移到步骤(2)活化后的SPE96孔板上，用氮气正压装置压干，依次加入0.1～1mL水与甲醇进行淋洗；再加入0.5～2mL 2％甲酸甲醇溶液洗脱，用96孔接收板收集洗脱液，通25～60℃氮气直至干燥；(4)将步骤(3)得到的残渣，进一步用50～200μL复溶液复溶，涡旋使充分溶解，上高效液相色谱串联质谱系统进样5～50μL分析检测。