[发明专利]制备经不对称标签化的测序文库的方法在审
| 申请号： | 201880007464.1 | 申请日： | 2018-01-16 |
| 公开（公告）号： | CN110191961A | 公开（公告）日： | 2019-08-30 |
| 发明（设计）人： | B·J·皮特;D·陶西格;B·阿雷齐;R·A·阿科;N·M·桑帕斯 | 申请（专利权）人： | 安捷伦科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6869 | 分类号： | C12Q1/6869;C40B40/06;C40B50/06 |
| 代理公司： | 北京坤瑞律师事务所 11494 | 代理人： | 封新琴 |
| 地址： | 美国加利*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 提供了用于制备经不对称标签化的测序文库的方法。在一些实施方案中，所述方法可包括：获得cDNA或基因组DNA片段的经对称标签化的文库，将带尾的第一引物与所述文库的3'序列标签杂交并延伸其产生引物延伸产物，并使用带尾引物对扩增所述引物延伸产物以产生经不对称标签化的文库。 | ||
| 搜索关键词： | 标签化 不对称 文库 引物延伸产物 测序文库 带尾 制备 基因组DNA片段 引物对扩增 第一引物 序列标签 对称 杂交 延伸 | ||
【主权项】：
1.一种制备经不对称标签化的测序文库的方法，所述方法包括：(a)获得cDNA或基因组DNA片段的经对称标签化的文库，其中所述文库的至少一些成员包含含有5'序列标签和3'序列标签的顶链，其中所述5'和3'序列标签包含互补序列；(b)使第一引物与所述文库的3'序列标签的区杂交，其中所述第一引物包含与所述文库的3'序列标签的所述区互补的3'区和5'非互补尾；(c)延伸所述第一引物以产生引物延伸产物，所述引物延伸产物从5'至3'包含所述第一引物的序列、片段的序列和(a)的5'序列标签的互补序列；以及(d)使用以下来扩增(c)的引物延伸产物：i包含序列A4的正向引物；和ii式A5‑A2的反向引物，其中序列A5是5'尾，并且序列A2包含在(a)的5'序列标签中；以产生经不对称标签化的文库，其中至少一些成员包含顶链，所述顶链包含i.包含序列A5的第一末端，ii.片段的序列，和iii.包含序列A4的互补序列的第二末端。
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