[发明专利]一种催化反应中酶循环使用的方法

摘要

本发明属于酶催化应用技术领域，特别涉及一种催化反应中酶循环使用的方法。本发明经过透析袋预处理、透析反应器组装、底物体系制备、透析反应、离心等步骤实现酶循环使用。本发明所提供的方法具有过程简单、稳定、易于放大，设备投资成本低，生产成本低，酶完全回收，催化转化率高等特点。采用本发明方法循环使用的酶具有酶活力高、性能稳定等特点。本发明提供的方法，可广泛应用于医药、食品、化工、环境处理等行业的催化反应中。

主权项

1.一种催化反应中酶循环使用的方法，其特征在于具体方法步骤如下：（1）透析袋的处理选择适宜截留分子量的市售透析袋，按照透析袋的容积︰质量分数为2～4%碳酸氢钠溶液的体积︰质量分数为0.5～1.5%EDTA溶液的体积之比为1︰5～10︰5～10的比例，将透析袋置于碳酸氢钠溶液与EDTA溶液的混合液中，在温度为60～80℃的条件下，预处理1～2h，分别收集预处理后的液体和预处理后的透析袋；然后再按照透析袋的容积︰纯化水的体积之比为1︰30～50的比例，将预处理后的透析袋置于纯化水中，在温度为60～80℃的条件下，清洗1～2h，分别收集清洗后的液体和清洗后的透析袋；对于收集的清洗后的透析袋，即为处理后的透析袋；其中，透析袋截留分子量的选择标准为：底物分子量<透析袋截留分子量<0.1～0.8倍酶分子量；（2）透析反应器的组装第（1）步完成后，先按照市售酶的质量︰纯化水的体积比为1 g︰300～1500 mL的比例，将酶分散于纯化水中，再放入超声波处理器中，控制温度为30～40℃，进行超声处理5～10min；超声完成后，收集分散液，即为酶液；再按照第（1）步收集的处理后的透析袋的容积︰酶液的体积之比为1︰0.2～0.5的比例，将酶液置于一端已用透析袋夹封闭的处理后的透析袋中，然后将另一端也用透析袋夹封闭，就组装出透析反应器，在温度为4～8℃下保存备用；（3）底物体系的制备以底物为原料，按照底物的质量︰缓冲溶液的体积之比为1 g︰50～300 mL的比例，将底物均匀分散于缓冲溶液中，收集溶液，即为底物体系；（4）透析催化反应第（3）步完成后，按照第（2）步组装的透析反应器︰第（3）步收集的底物体系的体积比为1︰30～200的比例，将透析反应器置于底物体系中，在温度为25～40℃，搅拌速度为100～250r/min下，进行透析催化反应2～10h，反应结束后，分别收集反应后的底物体系和反应后的透析反应器；（5）透析反应器的回收第（4）步完成后，将第（4）步收集的反应后的透析反应器置于冷冻离心机中，在温度为4～8℃，转速为2000～3000r/min下，冷冻离心1.5～3h，分别收集离心后的液体和离心后的透析反应器；对于收集的离心后的透析反应器，可按照第（2）步补加纯化水后继续作为透析反应器使用。