[发明专利]同步检测火龙果CVX和ZyVX两种病毒的双重RT-PCR方法在审
| 申请号： | 201910007837.1 | 申请日： | 2019-01-04 |
| 公开（公告）号： | CN109797244A | 公开（公告）日： | 2019-05-24 |
| 发明（设计）人： | 乔光;管丽婷;文晓鹏;洪怡 | 申请（专利权）人： | 贵州大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 贵阳中新专利商标事务所 52100 | 代理人： | 刘艳 |
| 地址： | 550025 贵州省贵*** | 国省代码： | 贵州;52 |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： | 本发明提供了一种能够同步检测火龙果CVX和ZyVX两种病毒的双重RT‑PCR方法，该方法通过对比CVX和ZyVX病毒外壳蛋白基因序列，选择两者保守序列分别设计特异性引物。通过优化后的RT‑PCR反应体系及条件，扩增目的基因片段，从而实现对这两种病毒的准确检测。该方法所需样品量少、技术难度小、准确性高、适用于大规模样品分析。该方法不仅可以快速准确地同步鉴定浸染两种病毒的样品，还能鉴定处于潜伏阶段而未表现出明显病毒感染症状的样品，从而实现对感病植物的早期诊断。 | ||
| 搜索关键词： | 病毒 同步检测 火龙果 病毒外壳蛋白基因 病毒感染症状 双重RT-PCR 特异性引物 保守序列 感病植物 技术难度 目的基因 样品分析 早期诊断 准确检测 样品量 浸染 扩增 优化 表现 | ||
【主权项】：
1.一种同步检测火龙果CVX和ZyVX两种病毒的双重RT‑PCR方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）提取试剂盒提取感病火龙果总 RNA；（2）以所提取的总 RNA 为模板，反转录合成第一链 cDNA；（3）以步骤（2）中获得的总RNA为模板，加入与待检测病毒的外壳蛋白基因对应的上下游引物，采用RT‑PCR进行扩增靶标基因；（4）将所得的产物在1%琼脂糖凝胶上进行电泳检测，利用凝胶成像系统观察电泳结果并拍照记录。
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