[发明专利]基于超滤-液相色谱-质谱快速筛选药物活性成分的方法

摘要

本发明公开了一种基于超滤‑液相色谱‑质谱快速筛选药物活性成分的方法：将中药提取物或其他来源的小分子混合物溶解于缓冲溶液中，加入酶共孵育；采用超速离心浓缩管过滤该溶液，反复多次，合并浓缩液，用缓冲溶液定容；采用液相色谱‑质谱联用技术分析与酶共孵育后色谱峰的变化。本发明实验了利用超滤‑UPLC‑MS对中药降糖活性成分进行了筛选，实验结果表明该方法可以对复杂成分中天然来源的具有活性的小分子化合物进行初步的快速筛选。本发明具有操作简单，快速批量筛选，实验重现性好，实验数据直观可靠等特点，为中药或复方的药效物质基础研究提供新的思路和方法。

主权项

1.一种基于超滤‑液相色谱‑质谱快速筛选药物活性成分的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)将多成分样品用缓冲溶液溶解后分为相同的两份，以其中一份为结合前样品，向另一份中加入拟筛选药物靶点所对应的酶，得结合样品；2)通过孵育使得结合样品中能够与所述酶稳定结合的化合物部分或全部由游离态转变为结合态，得孵育液；将孵育液超滤并收集滤液，将滤液用所述缓冲溶液定容，得分析样品；3)将结合前样品按照与步骤2)相同的孵育、超滤和定容过程进行处理，得到对照样品，对分析样品和对照样品分别采用相同条件的液相色谱‑质谱联用技术进行分析；4)比较分析样品和对照样品的液相色谱‑质谱分析结果中色谱峰的变化，将发生变化的色谱峰所对应的化合物作为初步筛选得到的与所述靶点对应的候选药物活性成分或先导化合物。