[发明专利]一种提高毕赤酵母表面展示β-葡萄糖醛酸苷酶活性的方法有效
| 申请号： | 201910023085.8 | 申请日： | 2019-01-10 |
| 公开（公告）号： | CN110358754B | 公开（公告）日： | 2021-07-09 |
| 发明（设计）人： | 冯旭东;李春;王旭东;吕波 | 申请（专利权）人： | 北京理工大学 |
| 主分类号： | C12N9/24 | 分类号： | C12N9/24;C12N15/81;C12N15/62;C12P33/00 |
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| 地址： | 100081 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种提高毕赤酵母表面展示β‑葡萄糖醛酸苷酶活性的方法。该方法包括：(1)将来自于酿酒酵母基因组的Agα1蛋白的编码基因与来源于米曲霉β‑葡萄糖醛酸酶(PGUS)的编码基因融合，导入到毕赤酵母细胞中，得到通过Agα1表面展示PGUS的重组酵母细胞；(2)将来自于酿酒酵母基因组的Pir1蛋白的编码基因与PGUS的编码基因融合，导入(1)获得的重组毕赤酵母细胞中，得到Agα1与Pir1两种锚定蛋白共同展示PGUS的重组酵母菌株。实验证明，这种方法能够显著增加毕赤酵母表面展示PGUS蛋白的量，且大幅提高了PGUS的稳定性。该方法解决了通过酶解法转化甘草酸为甘草次酸过程中存在的GUS不稳定与低效率的问题，同时对优化酵母表面展示效率的研究提供了方法指导。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提高 酵母 表面 展示 葡萄 糖醛酸 活性 方法 | ||
【主权项】：
1.一种利用毕赤酵母表面展示β‑葡萄糖醛酸苷酶的方法，其特征在于，所述的β‑葡萄糖醛酸苷酶是由基因序列如GenBank登录号为EU095019所编码，分别使用Pir1锚定蛋白和Agα1锚定蛋白进行β‑葡萄糖醛酸苷酶的表面展示，所述β‑葡萄糖醛酸苷酶位于N端，锚定蛋白与β‑葡萄糖醛酸苷酶之间通过linker连接。
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